ELISA、FC用 抗CD95ウサギモノクローナル抗体 - P25446

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：CD95の機能と局在

• CD95（FAS、Apo-1）は、腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリーの一員であり、そのリガンドFASLGに結合するとアポトーシスを媒介する膜貫通タンパク質です。
• 受容体の細胞内デスドメインはFADDとカスパーゼ-8をリクルートし、アポトーシスカスケードを引き起こすデス誘導シグナル複合体（DISC）を形成します。
• FASを介したアポトーシスは、末梢寛容と成熟T細胞の抗原刺激による自殺に重要です。
• 細胞膜および膜ラフトに局在し、CD95は胸腺、肝臓、肺、心臓、成体卵巣を含む様々なマウス組織で発現しています。
• 翻訳後修飾には、グリコシル化、脂質化（パルミチン酸付加）、リン酸化が含まれます。タンパク質はジスルフィド結合とシグナルペプチドを含みます。
• 成熟タンパク質の予測分子量は約37 kDaですが、グリコシル化により還元条件下ではより高く見える場合があります。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原（aa 22-169）は細胞外ドメインにまたがるため、この抗体は天然および変性条件下での表面CD95の検出に適しています。
• ELISAでは、組換えCD95-Fc融合タンパク質でのコーティングまたは細胞溶解物の使用を検討してください。抗体は0.1-1 µg/mLから滴定を開始することをお勧めします。
• フローサイトメトリーでは、10^6細胞あたり0.5-2 µgを使用してください。非特異的結合を最小限に抑えるために、適切なアイソタイプコントロールとブロッキングステップを含めてください。
• 抗体特異性は、標的認識を確認するためにCD95ノックアウトマウスモデルまたは細胞株を使用して検証してください。
• 内因性CD95発現レベルは組織や活性化状態によって異なることに注意し、予備実験を行うことをお勧めします。

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