WB、IF/ICC、IP、ELISA向け抗CDK4ポリクローナル抗体 - P11802

製品コア仕様・パラメータ

生物学的背景：CDK4の機能と局在

• CDK4（サイクリン依存性キナーゼ4）は、細胞分裂タンパク質キナーゼ4またはPSK-J3とも呼ばれ、CDK4遺伝子にコードされるセリン/スレオニンタンパク質キナーゼです。細胞周期進行を調節するサイクリンD-CDK4複合体の主要な構成要素です。
• サイクリンD-CDK4複合体の一員として、CDK4はG1/S期移行時にRB1を含む網膜芽細胞腫（RB）タンパク質ファミリーのメンバーをリン酸化して阻害します。このリン酸化により、転写因子E2FがRB/E2F複合体から解離し、G1期通過に必要なE2F標的遺伝子の転写が可能になります。
• CDK4はG1期初期にRB1を低リン酸化状態にし、サイクリンD-CDK4複合体における活性を通じて、様々な分裂促進シグナルおよび抗分裂シグナルの主要な統合因子として機能します。
• CDK4はまた、細胞周期依存的にSMAD3をリン酸化し、その転写活性を抑制することから、RB制御を超えた役割を持つことがわかっています。
• CDK4はサイクリンDおよびCDKN1B（p27）と三量体複合体を形成し、これはサイクリンD-CDK4複合体の核内移行と活性に必要です。
• 細胞内局在は細胞質、核、核膜に及び、細胞周期制御における動的な役割を反映しています。
• UniProtのキーワードでは、アセチル化、選択的スプライシング、ATP結合、細胞周期、細胞分裂、疾患バリアントへの関与が示されており、癌関連経路に関連するリンタンパク質です。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 本抗体の免疫原はヒトCDK4のアミノ酸200～303番に対応し、C末端側に近い領域です。このエピトープの性質から特定の用途で認識に影響が出る場合があるため、ご自身の実験条件で検証を行うことを推奨します。
• ウエスタンブロット（WB）では約34 kDaのバンドが予想されます。本抗体はヒトとマウスの両種に交差反応性が報告されているため、CDK4を発現するヒトおよびマウスの細胞溶解液での検証を行ってください。
• 免疫蛍光（IF/ICC）では、CDK4の細胞内局在に一致して、細胞質と核の両方に染色パターンが見られる可能性があります。適切な固定と透過処理の工程を実施してください。
• 本ポリクローナル抗体を用いた免疫沈降（IP）ではCDK4複合体が濃縮される可能性があります。三量体複合体を研究する場合は、サイクリンDまたはCDKN1Bの共沈降を確認することを検討してください。
• ポリクローナル抗体であるため、ELISAなどの定量アッセイではロット間の再現性を確認する必要があります。最適な作動希釈率を決定するために、滴定実験を実施してください。

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