WB・ELISA用抗CDK8ウサギモノクローナル抗体 - P49336

製品の主な仕様・パラメータ

生物学的背景：CDK8の機能と局在

• CDK8はサイクリン依存性キナーゼであり、ほぼ全てのRNAポリメラーゼII依存性遺伝子の制御された転写に必須なコアクチベーターであるメディエーター複合体のコア成分です。
• 遺伝子特異的調節タンパク質と基本転写装置を橋渡しし、RNAポリメラーゼIIおよび一般転写因子と共に前開始複合体の集合を足場として支えます。
• CDK8はRNAポリメラーゼIIのC末端ドメイン（CTD）をリン酸化し、転写開始複合体の形成を阻害することから、転写抑制因子として作用します。 関連文献: PMID:10993082
• CCNHをリン酸化し、TFIIH複合体のダウンレギュレーションを引き起こし、転写を抑制します。 関連文献: PMID:10993082
• MAML1との相互作用を介して、CDK8はNOTCHの細胞内ドメインを過剰リン酸化し、その分解を促進します。 関連文献: PMID:15546612
• CDK8はSTAT1のトランス活性化ドメインをリン酸化することで、インターフェロン応答を選択的に調節します。
• 主に核に局在するCDK8はセリン/スレオニンタンパク質キナーゼであり、活性化因子および抑制因子としての役割を持ち、遺伝子変異は自閉症スペクトラム障害や知的障害と関連しています。

実験ガイダンス・技術的ヒント

• 本抗体の免疫原はヒトCDK8のアミノ酸364～464番に対応しており、この領域が特異性をもたらすと考えられます。ご使用の実験系においてエピトープの一意性を確認することを推奨します。
• ウエスタンブロッティングでは、CDK8陽性が知られている溶解物（例：HeLa細胞やHEK293細胞）を用いて抗体希釈率を最適化し、予想される約53 kDaのバンドを確認してください。適切なローディングコントロールを必ず含めてください。
• ELISAの場合は、組換えCDK8タンパク質または細胞溶解物でコーティングを行い、濃度範囲全体でシグナルの直線性を検証してください。マウスCDK8との交差反応性があるため、2種を用いたアッセイにも対応可能です。
• 本抗体は組換えウサギモノクローナル抗体であるため、ロット間の再現性が高いと期待されますが、それでも新しい実験条件で使用する際には性能を再検証してください。
• CDK8は動的なリン酸化事象に関与していることに留意し、リン酸化シグナル状態を維持するため、サンプル調製時にホスファターゼ阻害剤カクテルの使用を検討してください。

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