WB、IHC-P、ELISA用抗CDKN1A/p21CIP1ウサギモノクローナル抗体 - P38936

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：CDKN1A/p21CIP1の機能と局在

• CDKN1Aと呼ばれるサイクリン依存性キナーゼ阻害因子1は、p21、CIP1、WAF1、SDI1、CAP20、CDKN1、MDA-6としても知られています。細胞周期の強力な調節因子として機能します。
• CDKN1Aは、DNA損傷に応答したp53/TP53介在性の細胞周期停止において重要な役割を果たし、G1/S進行を阻止してDNA修復を可能にします（PubMed:9106657）。 関連文献： PMID:9106657
• このタンパク質はサイクリン依存性キナーゼ（CDK）複合体に結合して阻害し、RB1などの主要基質のリン酸化を防ぐことで、細胞周期の進行を停止させます。
• 低い化学量論比では、CDKN1AはサイクリンD-CDK4複合体の核局在および形成を促進し、RB1に対するキナーゼ活性を高めます。一方、高い比率ではこの複合体を阻害します。
• CDKN1Aは増殖細胞核抗原（PCNA）への結合においてPOLD3と競合し、DNAポリメラーゼδによるDNA合成を阻害します（PubMed:11595739）。 関連文献： PMID:11595739
• このタンパク質は主に核に局在しますが、細胞質にも存在します。その核局在はCDK阻害に不可欠であり、活性はリン酸化、アセチル化、ユビキチン化などの翻訳後修飾によって調節されます。
• CDKN1Aは成体組織全体で広く発現しており、脳における発現量は他の組織と比較して約5分の1です。
• CDKN1Aはその標準的な役割に加え、アストロサイトおよび骨芽細胞において、CREB3L1経路を介したp53非依存性のDNA損傷誘導性G2停止にも関与します（類似性に基づく）。

実験ガイダンスおよび技術上のヒント

• 免疫原はヒトCDKN1A/p21CIP1のN末端164アミノ酸で構成され、全長タンパク質をカバーしています。ウエスタンブロットにより、抗体が約18 kDaの内在性p21を検出することを確認してください。
• 免疫組織化学（IHC-P）では、核および細胞質の両方が染色される場合があります。大腸癌や増殖細胞など、既知の陽性対照組織を用いて抗原賦活化条件と抗体希釈倍率を最適化してください。
• ELISAで使用する場合は、組換えp21タンパク質またはp53を活性化した試料由来の細胞ライセートを用いて標準曲線を作成し、特異性を検証してください。
• p21の発現はp53および細胞ストレスによって厳密に制御されるため、検出前にドキソルビシンなどのDNA損傷誘導剤で細胞を処理し、p21を誘導することを検討してください。

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