抗CDKN1A/p21CIP1 ウサギポリクローナル抗体（WB、IHC-P、IF/ICC、ELISA用途） - P38936

主要製品仕様・パラメータ

生物学的背景：CDKN1A/p21CIP1の機能と局在

• CDKN1A/p21CIP1はサイクリン依存性キナーゼ阻害剤であり、細胞周期の進行制御およびDNA損傷によるG2停止において重要な役割を担っています（PubMed:9106657）。 関連文献: PMID:9106657
• 本タンパク質は、DNA損傷に応答したp53/TP53依存的な細胞増殖阻害の中心的な媒介因子として機能するほか、特定の細胞種においてはp53非依存的なG2停止経路にも関与します。
• p21はサイクリン依存性キナーゼに結合してその活性を阻害し、RB1などの重要な基質のリン酸化を防いで細胞周期の進行をブロックします。また、サイクリンD-CDK4複合体の核内局在および集合を促進し、キナーゼ活性に対する影響は化学量論に依存します。
• PCNA（増殖細胞核抗原）に結合し、POLD3とPCNAへの結合を競合することでDNA合成を阻害し、これによりDNAポリメラーゼδのプロセッシビティを遮断します（PubMed:11595739）。 関連文献: PMID:11595739
• CDKN1Aは細胞質と核の両方に局在し、複数の細胞内区画で細胞周期機構やその他のプロセスを制御することができます。
• 成体組織全体に遍在的に発現しており、特に脳では発現量が低いことが知られています。
• 本タンパク質はジンクフィンガードメインを有し、リン酸化やアセチル化をはじめとする翻訳後修飾を受けます。これらの修飾によって安定性や相互作用が調節されています。

実験ガイダンス・技術的アドバイス

• 本抗体の免疫原は、ヒトp21のアミノ酸1-164番にわたる合成ペプチドです。この領域にはCDKおよびサイクリン結合に関与するN末端ドメインが含まれるため、天然状態および変性したタンパク質を認識する抗体が得られる可能性があります。
• ウエスタンブロット（WB）解析では、p21に相当する約18 kDaのバンドが予想されます。ただし翻訳後修飾により、わずかな分子量シフトが観察される場合があります。
• 免疫組織化学（IHC-P）または免疫蛍光（IF/ICC）を実施する際には、安定した染色を得るために、サンプル調製および抗原賦活化の最適化が必要となる場合があります。
• 本抗体はマウスおよびラットのp21と交差反応性を示すことが確認されていますが、対象の組織や細胞株における特異性を事前に確認することを推奨します。
• ELISA用途では、最適なコーティング濃度および検出抗体濃度を決定するために、事前にチェッカーボードタイトレーションを実施することを推奨します。

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