WBおよびELISA用抗CFIポリクローナル抗体 - P05156

中核製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：CFIの機能と局在

• CFIはトリプシン様セリンプロテアーゼであり、C3bおよびC4bのα鎖を切断してこれらの重要なオプソニンを不活性化することで、全ての補体経路を負に制御する。
  関連参考文献: PMID:17320177 PMID:7360115
• その活性には、液相では因子HやC4BP、細胞表面では膜補助因子タンパク質（CD46）や補体受容体1（CR1）などの補因子を必要とする。
  関連参考文献: PMID:12055245 PMID:2141838 PMID:9605165
• 健康な宿主細胞上では、CFIを介した沈着C3bの分解が自己補体活性化を防ぐ一方で、保護的補因子を欠くアポトーシス細胞や微生物上では、C3bは活性を維持しオプソニン化と除去を促進する。
  関連参考文献: PMID:28671664
• CFIは主に肝細胞によって肝臓で発現するが、単球、線維芽細胞、ケラチノサイトでも見られる。
  関連参考文献: PMID:6327681 PMID:17320177 PMID:6444659
• このタンパク質は細胞外空間に分泌され、血液中を循環し、液相および細胞表面上でその調節機能を発揮する。
• CFIはジスルフィド結合、グリコシル化部位、カルシウム結合モチーフを含む。セリンプロテアーゼに分類され自然免疫に関与する。変異は加齢黄斑変性や溶血性尿毒症症候群と関連する。
• このタンパク質の予測分子量は約66 kDaであり、N結合型グリコシル化を受ける。

実験ガイダンスおよび技術的ヒント

• 免疫原（アミノ酸19-300）はヒトCFIのN末端部分にまたがり、プロCFIおよび成熟重鎖の両方を認識する可能性が高い。バンドパターンを解釈する際はこれを考慮すること。
• ウェスタンブロットでは、推奨開始希釈倍率は通常 1:500–1:2000。還元条件下で66 kDa付近にバンドが観察されることが予想され、グリコシル化やプロセシングによる追加バンドが生じる可能性がある。
• ELISAでは、検出条件の最適化が必要。この抗体は抗原捕捉または検出に使用できるが、サンドイッチ法を使用する場合は相補的な抗体との組み合わせを検証すること。
• マウスサンプルを分析する際は、反応性を確認すること。交差反応性は記載されているが、シグナル強度はヒトCFIと異なる場合がある。
• 常に適切な陽性対照（例：CFI発現細胞（肝細胞由来細胞株など）のライセート）および陰性対照（例：CFI枯渇血清）を含めること。

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