WB、IHC-P、IF/ICC、ELISA用抗クエン酸シンターゼウサギmAb - O75390

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：クエン酸シンターゼの機能と局在

• 標的タンパク質はクエン酸シンターゼであり、転移酵素ファミリー、特に転移反応においてアシル基をアルキル基へ変換するアシル基転移酵素に属するミトコンドリア酵素です。
• アセチル補酵素Aとオキサロ酢酸を縮合させてクエン酸を生成する反応を触媒します。これはエネルギー産生の中心的経路であるトリカルボン酸（TCA）回路の最初の律速段階です。
• この酵素は、TCA回路が機能し、酸化的リン酸化の前駆体が供給されるミトコンドリアマトリックスにのみ局在します。
• クエン酸シンターゼはTCA回路の主要酵素であるため、その活性は組織におけるミトコンドリア量および酸化能の指標としてよく使用されます。
• この酵素は、アセチル化、メチル化、ユビキチン結合など、活性を調節する可能性のある複数の翻訳後修飾を受けます。
• このタンパク質は、結晶構造解析（3D構造が利用可能）および直接的なタンパク質シーケンシングによって詳細に解析されており、分子量が約52 kDa（NP_004068.2から算出した推定値：約52 kDa）であることが確認されています。

実験ガイダンスおよび技術上のヒント

• 免疫原はヒトクエン酸シンターゼのアミノ酸28～145に相当します。この領域はミトコンドリアでのプロセシング後に露出する可能性が高く、成熟した内在性タンパク質を認識すると考えられます。
• ウェスタンブロッティングでは、52 kDa付近のバンドが予想されます。ミトコンドリア濃縮画分をロードするか、代謝活性の高い組織由来の全細胞ライセートを使用すると、検出性が向上する場合があります。
• 免疫組織化学（IHC-P）および免疫蛍光（IF/ICC）では、十分な抗原賦活化を行い、ミトコンドリア密度の高い組織（心臓、骨格筋など）でシグナルを検証することを検討してください。
• 本抗体はマウスおよびラットのクエン酸シンターゼと交差反応するため、一般的な前臨床モデルを用いた研究に利用できます。各用途では、適切な陽性対照および陰性対照を必ず含めてください。
• ELISAで使用する場合は、組換えクエン酸シンターゼを標準品として、最適なコーティング条件および抗体希釈倍率を実験的に決定してください。

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