ピロプトーシス研究向け切断型Gasdermin D（N末端）ウサギモノクローナル抗体 - P57764

主な製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：Gasdermin Dの機能と局在

• 炎症性カスパーゼによる切断後にN末端断片が放出され、膜に結合して孔を形成しピロプトーシスを誘発する、孔形成タンパク質の前駆体です。 関連参考文献: PMID:26375003 PMID:26375259 PMID:27281216
• 微生物感染および危険シグナルに応答してピロプトーシスを促進し、CASP1、CASP4、またはCASP5によって切断されます。形質膜に移行して内膜リン脂質に結合し、10～15nmの孔を形成することで、成熟IL1B、IL18、CASP7の放出を可能にします。 関連参考文献: PMID:26375003 PMID:26375259 PMID:27418190 PMID:27281216 PMID:29898893 PMID:36227980 PMID:33472215 PMID:37198476
• サイトゾルLPSに応答した非古典的インフラマソーム活性化を媒介します。また、ミトコンドリア膜に孔を形成してmtDNAを放出させ、細胞外に放出されたN末端断片は脂質結合特異性により細菌を直接殺傷します。 関連参考文献: PMID:27281216
• CASP3/CASP7による切断後、小腸において転写コアクチベーターとして機能します。核に移行してSTAT1をコアクチベートし、CIITAおよびMHCクラスIIを誘導することで、Tr1細胞を介した食物耐性を促進します。
• パパインアレルゲンによって切断されると、形質膜に孔が形成されIL33が特異的に放出され、2型炎症応答が誘発されます。 関連参考文献: PMID:35794369
• 食道の基底上細胞、ならびに胃の峡部/頚部、陥凹、腺に発現しており、分化細胞に優先的に発現することが示唆されています。
• 細胞内局在は細胞質、サイトゾル、インフラマソーム、細胞膜、分泌、ミトコンドリア膜、核であり、翻訳後修飾としてパルミトイル化、リン酸化、ユビキチン化を受けます。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原はAsp275切断部位を含んでいるため、本抗体は全長GSDMDではなく、切断されたN末端断片を選択的に認識すると予想されます。適切な陽性対照および陰性対照を用いて特異性を確認してください。
• ウエスタンブロットの場合、還元条件下でサンプルを電気泳動し、約30kDa（N末端断片）のバンドをプローブしてください。ピロプトーシスを誘発した細胞（例：LPS+ATP処理）の溶解物を用いて検証を行ってください。
• 免疫蛍光/ICCでは、固定および透過処理条件を最適化してください。ピロプトーシス細胞ではN末端断片が形質膜またはミトコンドリアに局在する可能性があります。
• ELISA用途では、異なるエピトープを標的とする捕捉抗体とのサンドイッチペアの使用を検討してください。組換えGSDMDタンパク質または細胞由来物質を用いて性能を検証してください。

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