WB、IF/ICC、ELISA用 抗コラーゲンI/COL1A2 ポリクローナル抗体 - P08123

主要製品仕様とパラメータ

生物学的背景：コラーゲンα-2(I)鎖の機能と局在

• コラーゲンα-2(I)鎖は、I型コラーゲンのサブユニットであり、人体で最も豊富な線維性コラーゲンで、結合組織に引張強度を提供します。
• 2本のα-1(I)鎖と共に、ヘテロ三量体型I型プロコラーゲン分子を形成し、これはプロテオリティック処理を受けて成熟したコラーゲン原線維に組み立てられます。
• I型コラーゲンは、皮膚、骨、腱、靭帯、その他の結合組織の細胞外マトリックスの主要な構造成分であり、骨ではヒドロキシアパタイトで石灰化した原線維に組織化されます。
• このタンパク質はシグナルペプチドを持つプレプロタンパク質として合成され、成熟鎖は細胞外空間に分泌され、コラーゲン線維の超分子集合体の形成に寄与します。
• 組織特異的発現：腱、靭帯、骨で高発現し、原線維の組織化は生体力学特性に重要です。COL1A2の変異は骨形成不全症およびエーラス・ダンロス症候群を引き起こします。
• 翻訳後修飾には、プロリンおよびリシン残基の水酸化、グリコシル化、ジスルフィド結合の形成が含まれ、これらは三重らせん構造の安定性と原線維の架橋に不可欠です。
• このタンパク質は、特徴的なGly-X-Yリピート（Xはしばしばプロリン、Yはしばしばヒドロキシプロリン）を持つ大きな三重らせんドメインを含み、インテグリン結合部位を介した細胞接着に関与します。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原は、ヒトCOL1A2のC末端領域（アミノ酸1161-1260）由来の合成ペプチドであり、プロ型と成熟型コラーゲンの両方を認識する可能性があります。ご自身のサンプルシステムで検証してください。
• ウエスタンブロットでは、コラーゲン三量体を解離させるために還元SDS-PAGE条件を使用してください。プロ-α-2鎖の理論分子量は約129 kDaですが、成熟処理型はより小さく見える場合があります。
• 免疫蛍光（IF/ICC）を行う際は、コラーゲンが分泌されることを考慮してください。細胞内プロコラーゲンを染色する場合は、透過化処理ステップを含め、ER/ゴルジマーカーとの共局在を確認してください。
• ELISA適用は、可溶性コラーゲン断片または細胞培養上清中の分泌コラーゲンを検出するために使用できます。ご自身のマトリックスに合わせてコーティングおよび検出条件を最適化してください。
• 本抗体はマウスおよびラットと交差反応するため、線維症、骨疾患、創傷治癒の動物モデルを用いたトランスレーショナル研究をサポートします。

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