ウエスタンブロット、IHC-P、ELISA用 抗COX IV ウサギモノクローナル抗体 - P13073

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：COX IVの機能と局在

• シトクロムcオキシダーゼサブユニット4アイソフォーム1（COX IV-1）は、ミトコンドリア電子伝達系の終末酵素である複合体IV（シトクロムcオキシダーゼ）の核コードサブユニットです。
• この酵素は、分子状酸素を水に還元する反応を触媒するホロ酵素の組み立てと調節に寄与することで、酸化的リン酸化において重要な役割を果たします。
• この酵素は、シトクロムcから酸素への電子伝達を、ミトコンドリア内膜を横切るプロトンの移動と共役させ、ATP合成に不可欠なプロトン勾配を生成します。
• COX IV-1はCOX4I1遺伝子によってコードされ、ヒト組織で普遍的に発現しており、成熟タンパク質の分子量は約19.5 kDaです。
• このタンパク質はミトコンドリア内膜に固定されており、ミトコンドリアへの輸送を指示する切断可能な移行ペプチドを伴って合成されます。
• 翻訳後修飾にはアセチル化とリン酸化が含まれ、これらは複合体IVの活性と組み立てを調節する可能性があります。
• COX4I1の変異は、重度の多臓器障害であるミトコンドリア複合体IV欠損症、核型16（MC4DN16）に関連しています。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 使用された免疫原（アミノ酸1–100内のN末端ペプチド）は、ヒト、マウス、ラット間で保存された領域でのエピトープ認識を示唆しており、観察された交差反応性を支持します。アイソフォーム特異的検出アッセイを設計する際は、これを考慮してください。
• ウエスタンブロッティングでは、COX IVの予測分子量は約20 kDaです。適切な陽性対照ライセート（例：HeLa、HEK293、または齧歯類肝臓のミトコンドリア画分）を使用して検出を検証してください。
• 免疫組織化学（パラフィン）では、標準的な抗原賦活化法（クエン酸緩衝液、pH 6.0、またはEDTA、pH 9.0）および内因性ペルオキシダーゼブロッキングを適用する必要があります。組織特異的な発現パターンは最適化が必要な場合があります。
• ELISAを実施する際、この抗体は天然または組換えCOX IVの捕捉試薬または検出試薬として使用できます。複合体IVホロ複合体またはサブアセンブリとの交差反応性はアッセイ設計に影響を与える可能性があるため、経験的な検証をお勧めします。
• 常に種を一致させた対照を含めてください。疾患モデルを研究する場合は、エピトープへのアクセス性を変化させる可能性のある変異の存在を確認してください。

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