WB、IF/ICC、IHC-P、ELISA用 抗COX5B モノクローナル抗体 - P10606

中核製品仕様とパラメータ

生物学的背景：COX5Bの機能と局在

• COX5B（別名：シトクロームcオキシダーゼサブユニット5B、COXVB）は、ミトコンドリア電子伝達系における複合体IV（シトクロームcオキシダーゼ）の核コード成分です。
• 分子状酸素の最終還元を水へと触媒し、電子伝達をミトコンドリア内膜を横切るプロトンポンプと共役させ、ATP合成を駆動します。
• このタンパク質はミトコンドリア内膜に特異的に局在し、シトクロームcオキシダーゼホロ酵素の他のサブユニットと会合します。
• COX5Bは、複合体IIおよびIIIと共に、NADHおよびコハク酸からの電子を酸素へ伝達し、電気化学的勾配を確立する呼吸鎖に寄与します。
• シトクロームcオキシダーゼの活性中心にはヘムA3と銅B（CuB）が含まれ、COX5Bは二核中心の完全性と機能維持において構造的役割を果たします。
• 翻訳後修飾にはアセチル化が含まれ、プロテオミクスおよび直接タンパク質配列決定により、このタンパク質が亜鉛イオン（金属結合）を結合することが同定されています。
• 成熟タンパク質（ミトコンドリア移行ペプチドの切断後）の分子量は約14 kDaであり、成熟サブユニットの大部分に相当します。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原は、ヒトCOX5Bのアミノ酸29–129にまたがる領域であり、これはミトコンドリア標的配列除去後の成熟タンパク質に対応します。この設計により、内因性のプロセッシングされた形態の認識が強化されます。
• ウェスタンブロッティング（WB）では、還元条件下およびミトコンドリア濃縮タンパク質抽出物の使用を検討し、約14 kDaのバンドの検出を最大化してください。
• 免疫蛍光（IF/ICC）および免疫組織化学（IHC-P）では、COX5B染色は通常、点状のミトコンドリアパターンを示します。局在を確認するためにオルガネラマーカーで検証してください。
• 本抗体はマウスおよびラットCOX5Bと交差反応します。免疫原領域の配列相同性は異なる可能性があるため、関連する種の細胞または組織ライセートでの反応性を確認してください。
• ELISAアプリケーションでは、ヒト、マウス、またはラットサンプルからの組換えCOX5Bまたはミトコンドリア画分を用いて、コーティング条件および抗体希釈を最適化してください。
• モノクローナル抗体として、ロット間の一貫した性能が期待できます。それでも、各新規アプリケーションについては、意図したサンプル系で力価決定および検証を行うべきです。

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