WB、IHC-P、ELISA用抗CRACR2Aウサギポリクローナル抗体 - Q9BSW2

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：CRACR2Aの機能と局在

• CRACR2Aは、EFハンドカルシウム結合ドメイン含有タンパク質4B（EFCAB4B）またはRas関連タンパク質Rab-46（RAB46）としても知られ、GTPase活性を持つカルシウム結合タンパク質です。ストア作動性カルシウム流入（SOCE）と細胞内輸送において二重の役割を果たします。 関連文献： PMID:27016526
• T細胞では、CRACR2Aは細胞質カルシウムセンサーとして機能し、ER-細胞膜接合部におけるORAI1とSTIM1のクラスター形成を促進して、CRACチャネルの活性化を促します。カルシウム流入が起こると複合体から解離し、チャネルの安定性を調節します。 関連文献： PMID:27016526
• Rab GTPaseとして、CRACR2Aはヒスタミン刺激に応答して、内皮細胞内のWeibel-Palade小体（WPB）を微小管形成中心（MTOC）へ逆行輸送します。この作用はカルシウム非依存的に行われます。 関連文献： PMID:31092558
• CRACR2Aはカルシウム制御性ダイニンアダプタータンパク質としても機能し、ダイニン介在輸送を活性化するとともに、CD47のエンドソーム輸送を調節します。 関連文献： PMID:30814157
• CRACR2Aは、T細胞の活性化時に免疫シナプスへ局在し、VAV1と相互作用して下流のCa2+-NFATおよびJNKシグナル伝達カスケードを活性化することで、TCRシグナル伝達経路を橋渡しします。 関連文献： PMID:27016526
• 細胞内では、CRACR2Aは細胞質、細胞膜、ゴルジ体、トランスゴルジネットワークに存在し、さらに小胞および微小管形成中心にも関連しています。その局在は、活性化状態および細胞種に応じて変化します。
• 組織発現はJurkatなどのT細胞株および内皮細胞で認められ、内皮細胞ではWeibel-Palade小体に特異的に局在します。 関連文献： PMID:25475730、PMID:31092558、PMID:27016526、PMID:30814157
• このタンパク質には、カルシウム結合のためのEFハンドドメイン、GTPaseドメイン、および（キーワードに示されているように）プレニル化を受ける部位が含まれており、膜結合性が示唆されます。選択的スプライシングにより複数のアイソフォームが存在します。

実験ガイダンスおよび技術的ヒント

• 免疫原はヒトCRACR2AのN末端領域（アミノ酸1～200）に相当し、アイソフォーム間で保存されたエピトープを標的とする可能性があります。実験系におけるアイソフォーム特異的な検出を確認することを検討してください。
• ウェスタンブロッティングでは、予測分子量は約83 kDaです。内在性CRACR2Aを解析する際は、移動度に影響を及ぼす可能性のある翻訳後修飾やスプライスバリアントに注意してください。
• 免疫組織化学（IHC-P）では、使用する組織および抗体の結合特性に応じて抗原賦活化条件を最適化する必要があります。適切な陽性対照（例：T細胞に富む組織）および陰性対照を用いて染色パターンを検証してください。
• 供給元の仕様によれば、本抗体はマウスサンプルと交差反応しますが、使用前にマウス組織または細胞株で特異性を検証することを推奨します。
• ELISAで使用する場合は、ウサギポリクローナル抗体に適合する二次検出システムの使用を検討し、抗体を滴定して最適な作業濃度を決定してください。

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