抗Cullin 4Aウサギポリクローナル抗体（WB、IF/ICC、IP、ELISA対応） - Q13619

主要製品仕様・パラメータ

生物学的背景：Cullin-4Aの機能と局在

• CUL4Aはカリン-RING E3ユビキチンリガーゼ複合体（CRL）のコア足場タンパク質として機能し、基質タンパク質とユビキチン結合酵素の両方を配置することで、基質タンパク質へのユビキチン転移を可能にします。リガーゼ活性はカリンのネド化に依存し、ネド化されていないCUL4AがCAND1と結合することで阻害されます。関連文献： PMID:14578910, PMID:14739464, PMID:15448697
• DCX(DDB2)複合体はDDB2を基質受容体として利用し、XPC、ヒストンH3-H4、その他の標的をユビキチン化し、ヌクレオチド除去修復と複製に連動したヌクレオソーム集合において重要な役割を果たします。関連文献： PMID:15811626, PMID:16678110, PMID:17041588, PMID:24209620
• DCX(DTL)複合体を介して、CUL4AはDNA損傷応答およびDNA複製時に、PCNA依存的なCDT1のポリユビキチン化とMDM2依存的なp53/TP53のユビキチン化を媒介し、DTLの自己ユビキチン化も誘導します。さらに、DDB1-CUL4A-DTL複合体はCRY1をユビキチン化して分解することで概日リズムを調節しています。関連文献： PMID:14578910, PMID:15448697, PMID:15548678, PMID:23478445, PMID:26431207
• DCX(ERCC8)複合体（CSA複合体）は転写結合型修復（TCR）に関与し、活発に転写されている遺伝子からDNA損傷を除去します。関連文献： PMID:12732143, PMID:32355176, PMID:38316879
• DCX(AMBRA1)複合体は、リン酸化されたサイクリンD（CCND1、CCND2、CCND3）を標的としてユビキチン化・分解することで、G1/S細胞周期移行のマスターレギュレーターとして機能します。また、Elongin-C（ELOC）をユビキチン化・分解することでCRL5複合体を調節しています。関連文献： PMID:33854232, PMID:33854239, PMID:30166453
• CUL4Aは他にも多数の基質のユビキチン化に関与しており、（DET1-COP1を介した）JUN、（DDB1-SKP2と共に作用する）CDKN1B/p27、HOXA9などが含まれ、広範な調節的役割を持つことが知られています。関連文献： PMID:14739464, PMID:16537899, PMID:14609952
• CUL4Bと共同で、CUL4Aはリボソーム生合成に寄与しています。関連文献： PMID:26711351

実験ガイダンス・技術的ヒント

• 免疫原はヒトCUL4Aのアミノ酸1～300番にわたる合成ペプチドであるため、本抗体はN末端領域を標的としています。このことは、一部のアッセイにおいてエピトープのアクセス性に影響を与える可能性があります。
• ウエスタンブロッティング（WB）では約88 kDaの位置にバンドが検出されます。溶解時にプロテアーゼ阻害剤を添加し、分解を防ぐため新鮮なサンプルの使用を検討してください。
• 免疫沈降（IP）では、非変性条件下で天然のCUL4A複合体を捕捉する本抗体の能力を検証してください。
• 免疫蛍光（IF/ICC）では、CUL4Aが主に核内に存在するため、固定/透過処理プロトコルを最適化し、適切な対照を用いて染色特異性を確認してください。
• 本抗体はヒト、マウス、ラットのCUL4Aと交差反応します。げっ歯類のサンプルを使用する場合は、検出系が適合していること、IPにおいて対象バンドが内在性免疫グロブリンと区別できることを確認してください。
• ポリクローナル抗体であるため、ロット間でばらつきが生じる可能性があります。新しい用途ごとに抗体の力価を調整し、陽性対照と陰性対照を含めることを推奨します。

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