抗CXCL12/SDF-1 ウサギポリクローナル抗体（WB、IHC-P、IF/ICC、ELISA対応） - P48061

製品コア仕様・パラメータ

生物学的背景：CXCL12の機能と局在

• CXCL12は間質細胞由来因子1（SDF-1）としても知られる分泌型CXCケモカインで、選択的スプライシングにより複数のアイソフォーム（アルファ、ベータ、ガンマ、デルタ、イプシロン、シータ）が存在します。
• CXCL12はCXCR4受容体に結合して活性化することで、細胞内への迅速なカルシウム動員と方向性のある細胞遊走を引き起こし、好中球ではなくTリンパ球および単球に対する走化性因子として機能します。 関連文献: PMID:18802065, PMID:39093700, PMID:8752281
• また、非定型ケモカイン受容体ACKR3（CXCR7）にも結合します。ACKR3はスカベンジャー受容体として機能し、ベータアレスチンシグナル伝達経路を活性化します。 関連文献: PMID:16107333, PMID:19255243
• CXCL12は、CXCR4とは独立したアロステリック結合部位を介して、インテグリンITGAV:ITGB3、ITGA4:ITGB1、ITGA5:ITGB1を活性化することができます。 関連文献: PMID:29301984
• LYNキナーゼを介した機構によりLFA-1のICAM-1への結合を阻害することで、単球の遊走を正に制御し、単球の接着を負に制御します。 関連文献: PMID:18802065
• 切断型のSDF-1-alpha(3-67)は走化性活性が低下しており、細胞表面プロテオグリカンへの結合がこの切断形成を阻害することで、局所での完全長CXCL12の活性が維持されます。 関連文献: PMID:14525775
• アイソフォームアルファとベータは遍在的に発現しており、特に肝臓、膵臓、脾臓で発現量が最も高く、アイソフォームガンマは主に心臓で発現し、デルタ、イプシロン、シータアイソフォームは膵臓で最も高い発現が認められます。
• 成熟分泌タンパク質は、2つのジスルフィド結合とシグナルペプチドを含む重要な構造特徴を持ち、分子量は約11 kDaです。

実験ガイダンス・技術的ヒント

• 本抗体の免疫原は、成熟ケモカインドメイン内の領域であるヒトCXCL12（NP_000600.1）のアミノ酸40～93番に対応しているため、分泌タンパク質を認識することが期待されます。ウエスタンブロットの場合、還元条件下でサンプルを調製し、標準的なSDS-PAGEプロトコルを使用してください。初期の希釈倍率は1:500～1:2000の範囲で開始し、その後最適化することを推奨します。
• IHC-Pの場合、加熱による抗原回収を実施し、適切な組織対照を用いて染色を検証してください。CXCL12は分泌タンパク質であるため、細胞外の染色パターンが観察される可能性があります。
• IF/ICCでは、細胞内シグナルを増強するために分泌阻害剤（例：ブレフェルディンA）の使用を検討してください。固定・透過処理条件を最適化してください。本抗体はゴルジ体・分泌経路を標識する可能性があります。
• 本抗体はマウスおよびラットCXCL12と交差反応するため、これらの種を用いた研究に適しています。ただし、対象のモデル系においては常に特異性を確認してください。
• 選択的スプライシングにより、WBで複数のバンドが検出される場合があります。各アイソフォームの既知分子量（アルファ約11 kDa）と比較してください。陽性対照（例：組換えCXCL12または高発現細胞株）を使用して反応性を確認してください。

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