WB、ELISA用 抗CXCR4ウサギモノクローナル抗体 - P61073

中核製品仕様およびパラメータ

生物学的背景: CXCR4の機能と局在

• CXCR4 (C-X-Cケモカイン受容体タイプ4、CD184、Fusin) は、ケモカインCXCL12/SDF-1に特異的に結合するGタンパク質共役受容体 (GPCR) です。リガンド結合は、Giタンパク質との共役を介して細胞内カルシウムイオンレベルを上昇させ、MAPK1/MAPK3の活性化を増強し、アデニル酸シクラーゼを阻害することにより、シグナル伝達を引き起こします。 関連文献: PMID:10074102, PMID:10452968, PMID:10644702, PMID:16725153, PMID:17197449, PMID:18799424, PMID:39093700
• CXCR4シグナル伝達はAKT経路に関与し、細胞遊走を調節し、創傷治癒において重要な役割を果たします。 関連文献: PMID:24912431, PMID:28978524
• CXCL12に加えて、CXCR4は細胞外ユビキチン (細胞内カルシウムを上昇させcAMPを減少させる) および細菌リポ多糖 (LPS) の受容体として機能し、単球による炎症性サイトカイン (TNF) の分泌を媒介します。 関連文献: PMID:20228059, PMID:11276205
• ウイルス感染において、CXCR4はヒト免疫不全ウイルス-1 (HIV-1) X4分離株の共受容体 (CD4とともに) として、および一部のHIV-2分離株の一次受容体として機能し、ウイルス侵入を促進します。 関連文献: PMID:10074122, PMID:10756055, PMID:8849450
• 細胞内局在は主に細胞膜、細胞間接着部にあり、初期エンドソーム、後期エンドソーム、リソソームを循環します。
• 翻訳後修飾には、スルフェーション、リン酸化、グリコシル化、およびジスルフィド結合の形成が含まれます。また、ユビキチン化の対象となります。この受容体はプロテオグリカンです。
• CXCR4は広く発現しており、アイソフォーム1が主要であり、末梢血白血球、脾臓、胸腺、脊髄、心臓、胎盤、肺、肝臓、骨格筋、腎臓、膵臓、脳 (小脳、大脳皮質、延髄、ミクログリア、アストロサイト)、および内皮細胞を含む組織で見られます。選択的スプライシングにより追加のバリアントが生じます。
• 類推により、CXCR4は造血、心臓心室中隔形成、消化管血管新生、および小脳/海馬ニューロン発達に寄与します。

実験ガイダンスおよび技術的ヒント

• 免疫原はC末端細胞内領域 (aa 253-352) に対応しており、この抗体は細胞質ドメイン内のエピトープを標的としている可能性が高いことを示唆しています。ウェスタンブロットでは、エピトープを露出させるために変性および還元条件を推奨します。
• ウェスタンブロットでは、CXCR4の予測分子量は約40 kDaですが、グリコシル化やその他の翻訳後修飾により、特定の細胞種では見かけのバンドがより高い分子量にシフトする可能性があります。
• ELISAアプリケーションでは、サンドイッチアッセイを開発する場合、異なる細胞外エピトープを標的とする検出抗体とのペアリングを検討してください。常に適切な陽性対照および陰性対照を用いてアッセイ条件を検証してください。
• CXCR4は多くの免疫細胞および内皮細胞で発現しているため、良い陽性対照ライセートにはJurkat、THP-1、またはPBMCが含まれます。組織の場合、脾臓または胸腺がうまく機能する可能性があります。
• HIV共受容体機能を研究する場合、この抗体が細胞内エピトープを標的としているため、ウイルス侵入を阻害しない可能性があることに注意してください。

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