WB、IHC-P、IF/ICC、ELISA用抗DAPK3ウサギポリクローナル抗体 - O43293

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：DAPK3の機能と局在

• DAPK3（Death-associated protein kinase 3）は、ZIPKまたはDlkとしても知られるセリン／スレオニンキナーゼであり、アポトーシス、オートファジー、転写、翻訳、アクチン細胞骨格のダイナミクスの制御において中心的な役割を果たします。
• DAPK3は、ミオシン軽鎖（MYL12B、MYL9）およびミオシンホスファターゼ標的サブユニット（PPP1R12A）をリン酸化することで、平滑筋の収縮や非筋細胞におけるアクチンストレスファイバーの形成を調節します。
• このキナーゼは、カスパーゼ依存性（I型）およびカスパーゼ非依存性（II型）の両方の細胞死経路に関与し、その過剰発現は細胞環境に応じてアポトーシスまたはオートファジー性細胞死を誘導する可能性があります。
• DAPK3は、核、PMLボディ、中心体、動原体、紡錘体、ミッドボディ、アクチン細胞骨格など、複数の細胞内区画に局在し、多様な機能的役割を担っていることを示しています。
• DAPK3はNLKおよびTCF7L2との相互作用を介して標準的なWnt／β-カテニンシグナル伝達を正に制御し、アンドロゲン受容体を介した転写を促進することで、発生経路およびホルモン経路に関与しています。
• インターフェロンγ刺激下では、DAPK3はリボソームタンパク質RPL13Aをリン酸化し、RPL13Aのリボソームからの放出とGAIT複合体への関与を促進して、特定の転写産物の翻訳を阻害します。
• このタンパク質は組織全体で広く発現しており、アイソフォーム1およびアイソフォーム2は膀胱平滑筋に特に多く存在し、潜在的な腫瘍抑制因子に分類されています。

実験上の指針および技術的ヒント

• 免疫原はヒトDAPK3のN末端領域（アミノ酸1～100）に相当するため、本抗体はこのドメイン内のエピトープを認識すると予想されます。
• ウエスタンブロッティングでは、DAPK3の予測分子量と一致する約53 kDaのバンドが観察されるはずです。標的を発現する適切な細胞株または組織由来のライセートで検出を確認してください。
• 免疫組織化学（IHC-P）および免疫細胞化学（IF/ICC）では、固定および抗原賦活化の条件が染色に影響する可能性があります。抗体濃度を滴定し、特異性を確認するために、適切な対照（ノックダウンまたはノックアウトサンプルなど）を含めてください。
• 本抗体はマウスおよびラットのDAPK3と交差反応すると報告されています。これは免疫原領域の配列保存性による可能性がありますが、使用者は各自の実験系で反応性を検証する必要があります。
• ポリクローナル抗体であるため、ロット間でばらつきが生じる可能性があります。新しいロットごとに滴定を行い、非特異的結合が疑われる場合は、競合アッセイ用のブロッキングペプチドの使用を検討することを推奨します。

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