WB、IF/ICC、ELISA用抗DAPP1ポリクローナル抗体 - Q9UN19

製品の主要仕様およびパラメータ

DAPP1の生物学的背景：機能と局在

• DAPP1（BAM32としても知られる）は、約32 kDaのBリンパ球アダプタータンパク質です。
• ホスホチロシンおよび3-ホスホイノシチドに対する二重アダプターとして機能し、B細胞抗原受容体（BCR）シグナル伝達を下流のホスホイノシチド3-キナーゼ（PI3K）経路に結び付けます。
• このタンパク質にはSH2ドメインおよびプレクストリン相同性（PH）ドメインが含まれており、膜へのリクルートメントとタンパク質間相互作用を可能にします。
• DAPP1は主に細胞質に局在し、活性化時には細胞膜と結合することがあります。
• 組織発現は胎盤および肺で最も高く、脳、心臓、腎臓、肝臓、膵臓、骨格筋では低いレベルです。
• Bリンパ球に特異的に発現し、Tリンパ球や非造血細胞では検出されません。
• 翻訳後修飾にはリン酸化が含まれ、シグナル伝達における役割と一致しています。
• 選択的スプライシングにより複数の転写産物バリアントが生成され、その機能的多様性を調節する可能性があります。

実験ガイダンスおよび技術的ヒント

• 免疫原はDAPP1の中央領域にあたるアミノ酸100～273にまたがっており、この設計により全長DAPP1の検出性が高まる可能性がありますが、アイソフォーム特異性については検証が必要です。
• ウェスタンブロッティングでは、DAPP1は細胞質および膜結合性のタンパク質です。適切な溶解バッファーを使用し、膜画分を保持するために低速遠心分離を検討してください。
• 免疫蛍光法では、膜局在は刺激依存的である可能性があります。細胞質および膜の両方のプールを可視化できるよう、固定および透過化条件を最適化してください。
• ELISAでは、ペプチド免疫原を陽性対照として使用できる場合があります。ただし、類似したSH2/PHドメインタンパク質に対する滴定および交差反応性試験を実施することが推奨されます。
• DAPP1の発現はB細胞特異的です。特異性を確認するには、T細胞株ではなくBリンパ球株（例：Ramos、Raji）で抗体性能を検証してください。

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