WB、ELISA用抗DARPP32ウサギモノクローナル抗体 - Q9UD71

製品仕様およびパラメータの概要

生物学的背景：DARPP32（PPP1R1B）の機能と局在

• PPP1R1B遺伝子にコードされるDARPP32は、プロテインホスファターゼ1（PP1）およびプロテインキナーゼA（PKA）の制御を介して、ドーパミンとcAMPのシグナルを統合する二機能性シグナル伝達分子です。
• PKAによってThr34がリン酸化されると、PP1の強力な阻害因子として作用し、下流の神経基質のリン酸化状態を変化させ、シナプス可塑性を調節します。
• また、サイクリン依存性キナーゼ5（CDK5）によってThr75がリン酸化されると、PKA阻害因子へと変換され、線条体ニューロンにおける分子スイッチとしての役割を示します。
• DARPP32は主に細胞質に存在し、線条体の中型有棘ニューロンに豊富に発現しており、ドーパミン、グルタミン酸、その他の神経伝達物質の作用を媒介します。
• PPP1R1B転写産物の選択的スプライシングにより、十分に特徴づけられた全長型や短縮型など、複数のアイソフォームが産生され、それぞれ異なる機能特性を持つ可能性があります。
• アセチル化や複数部位でのリン酸化などの翻訳後修飾により、その活性、安定性、細胞内分布が微調整されます。
• DARPP32シグナル伝達の調節異常は、パーキンソン病、統合失調症、薬物依存症などの神経疾患および精神疾患と関連しています。
• 標準アイソフォームの理論分子量は約23 kDaであり、ウエスタンブロッティングで観察されるバンドと一致します。

実験ガイダンスおよび技術的ヒント

• ウエスタンブロットでは、DARPP32のリン酸化状態を保持するため、ホスファターゼ阻害剤およびプロテアーゼ阻害剤を含む調製直後のRIPAバッファーを使用してください。
• DARPP32で一般的に観察される凝集アーティファクトを回避するため、還元条件のローディングバッファーを使用し、サンプルを70°Cで10分間加熱することを検討してください。
• 免疫原はN末端領域（aa1-100）に対応しているため、この抗体は全長タンパク質および一部のN末端断片を認識すると考えられます。
• 配列保存性が高いため、特にマウスまたはラット組織を扱う場合は、ノックアウトまたはsiRNAノックダウンサンプルで抗体の特異性を検証してください。
• ELISAでは、免疫ペプチドまたは組換えDARPP32タンパク質を標準物質として用い、チェッカーボード滴定により最適なコーティング濃度を決定してください。
• 各実験には、既知の陽性対照（例：線条体組織ライセート）および陰性対照（例：非神経細胞株）を含めてください。
• 一部のサンプルではDARPP32が低存在量のリン酸化タンパク質であるため、高感度ECL基質の使用など、シグナル増強法が検出に必要となる場合があります。

CamelBio：ワンストップの調達ブリッジ

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