WB、IHC-P、IP、ELISA用 抗DARSウサギポリクローナル抗体 - P14868

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：DARSの機能と局在

• DARS（アスパラギル-tRNAシンテターゼ、AspRSとも呼ばれる）および細胞増殖誘導遺伝子40タンパク質は、ヒトではDARS1遺伝子によってコードされています。これは、タンパク質翻訳において基本的な役割を果たすクラスIIアミノアシル-tRNAシンテターゼファミリーに属します。
• この酵素は、2段階の反応でアスパラギン酸をその認識tRNAに特異的に結合させます：まずアスパラギン酸がATPによって活性化されてアスパラギル-AMPを形成し、その後tRNAアクセプター末端に転移されます。これは、正確な細胞質タンパク質合成のための重要なステップです。
• DARSは主に細胞質に局在しており、リボソーム翻訳のためのアスパラギル-tRNAを供給するために不可欠であり、細胞のプロテオーム維持と成長に直接的に影響を与えます。
• 組織特異的発現解析により、発生中および成体の脳、特に脳室/脳室下帯、海馬亜領域、および大脳皮質で高レベルの発現が示されており、ニューロンでの優先的な発現が見られます。結腸の末梢ニューロンもDARSを発現しています。
• プロテオミクス研究により、DARSのアセチル化とリン酸化が同定されており、これらの翻訳後修飾は、酵素活性、細胞内分布、またはタンパク質間相互作用を調節する可能性があります。
• DARSの病原性変異は、脳幹および脊髄の関与と乳酸上昇を伴う白質脳症（HBSL）と関連しており、これは重篤な神経学的障害であり、中枢神経系における本酵素の重要な役割を強調しています。

実験のガイダンスと技術的なヒント

• 免疫原配列（aa 222–501）はDARSの保存された触媒ドメイン内に存在します。この領域はヒト、マウス、ラット間で高い相同性を共有しており、観察された交差反応性を裏付けています。
• ウェスタンブロットでは、予測分子量は約57 kDaです。HeLa、HEK293、またはマウス/ラット脳ライセートなどのポジティブコントロールを使用して抗体を検証し、還元および非還元条件の両方を検討することをお勧めします。
• 免疫組織化学（IHC-P）では、最適な抗原回復と抗体希釈倍率を実験的に決定する必要があります。DARSは脳組織で高発現しているため、初期の検証にはヒトまたはロッドントの脳切片を推奨します。
• 免疫沈降を行う際、抗体のポリクローナルな性質は、天然のDARS複合体の捕捉を向上させる可能性があります。適切なアイソタイプコントロールとプレクリアリングステップを含めて、バックグラウンドを低減してください。
• ELISAアプリケーションの場合、本抗体はキャプチャーまたは検出試薬のいずれかとして使用できます。特異性を確保するために、滴定および近縁のシンテターゼに対する交差反応性アッセイを推奨します。
• ノックダウンまたはノックアウトモデルをネガティブコントロールとして使用して抗体特異性を確認できます。特に、正確な定量が必要な定量的アプリケーションにおいて推奨されます。

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