抗DDIT3/CHOP ウサギポリクローナル抗体（WB、IHC-P、IP、ELISA用途） - P35638

主要製品仕様・パラメータ

生物学的背景：DDIT3/CHOPの機能と局在

• DDIT3（DNA損傷誘導性転写物3）はCHOP（C/EBP相同タンパク質）、CHOP-10、GADD153とも呼ばれ、転写因子のC/EBPファミリーの一員であり、C/EBPが媒介する転写のドミナントネガティブ阻害剤として作用します。
• 小胞体（ER）ストレス応答の中心的な媒介因子として機能し、様々なストレス条件下で細胞周期停止とアポトーシスを引き起こします。 関連文献: PMID:15322075 PMID:15775988 PMID:19672300
• DDIT3は他のC/EBPタンパク質とヘテロ二量体を形成し、DNA結合能を損なわせ標的遺伝子の発現を抑制します。
• 転写調節因子として、TRIB3、BBC3/PUMA、BCL2L11/BIMといったアポトーシス促進性遺伝子を誘導する一方、アポトーシス抑制性のBCL2とMYOD1の発現を抑制します。 関連文献: PMID:15775988 PMID:17709599 PMID:20876114 PMID:18940792 PMID:19672300 PMID:20829347
• DDIT3はTCF7L2/TCF4に結合しその転写活性を遮断することで、標準的Wntシグナル伝達を負に制御します。 関連文献: PMID:16434966
• 本タンパク質は細胞質と核の間を動的に往来し、ERストレス時に核に蓄積して遺伝子発現プログラムを調整します。
• DDIT3はリン酸化やユビキチン様結合を含む翻訳後修飾を受けており、これらが活性とタンパク質の分解回転を調節している可能性があります。
• アポトーシス以外にも、カスパーゼ11（CASP4）依存的なIL-1βの成熟を促進することで炎症応答に関与し、NOS3の制御を通じて出生後の血管形成に寄与します。

実験ガイダンス・技術的ヒント

• 本抗体作製に使用された免疫原は、ヒトDDIT3のN末端領域（アミノ酸1～100番）に相当し、この領域は比較的保存されています。マウス・ラットに対する交差反応性は実験的に確認されていますが、その他の種を対象とする場合は配列アライメントによる確認を推奨します。
• ウエスタンブロット（WB）の場合：約19 kDaの位置にバンドを検出します。翻訳後修飾やストレス誘導性アイソフォームによって追加のバンドが生じる場合があることにご留意ください。ポリクローナル抗体は非特異的結合を生じる可能性があるため、バックグラウンドを低減するためにブロッキングと抗体希釈率の最適化を行ってください。
• 免疫組織化学（IHC-P）の場合：抗原回復処理を推奨します。DDIT3が発現上昇するERストレスまたはアポトーシス組織切片で染色の妥当性を検証してください。
• 免疫沈降（IP）の場合：本抗体は直鎖ペプチドエピトープに結合するため、天然型DDIT3を効果的に捕捉できるはずです。特異性を確認するために適切な陽性対照・陰性対照を含めてください。
• ELISAの場合：細胞ライセートまたは血清サンプル中のDDIT3定量に適しています。サンドイッチアッセイを開発する場合は、適合する検出抗体と組み合わせて使用してください。
• ポリクローナル抗体の性質上、ロット間の一貫性にばらつきが生じる可能性があります。長期研究を行う場合は参照用ロットを確保しておくことを推奨します。

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