WB、IHC-P、ELISA用 Anti-DDOST ポリクローナル抗体 - P39656

製品の中核仕様とパラメータ

生物学的背景：DDOSTの機能と局在

• タンパク質の同一性とアイソフォーム: DDOSTはドリキル-二リン酸オリゴ糖-タンパク質グリコシルトランスフェラーゼ48 kDaサブユニット（OST48、WBP1、AGER1、CDG1Rとも呼ばれる）をコードする。選択的スプライシングにより複数のアイソフォームが産生される。
• コアグリコシル化機能: このタンパク質はオリゴサッカリルトランスフェラーゼ (OST) 複合体の必須サブユニットであり、小胞体 (ER) 内の新生ポリペプチドのアスパラギン残基へ、ドリコール-ピロリン酸から事前に組み立てられた高マンノース型糖鎖 (Glc3Man9GlcNAc2) の一括転移を触媒する (PubMed:31831667)。
  関連参考文献:
  PMID:31831667
• 共翻訳的メカニズム: OST活性はSec61トランスロコンを介したタンパク質膜透過と連動しており、ER膜のルーメン側でN-グリコシル化が共翻訳的に起こることを可能にする。
• OST複合体の組み立て: DDOSTは、それぞれ共翻訳的および翻訳後グリコシル化を媒介するSTT3A含有およびSTT3B含有OST複合体の両方の組み立てに必要である (PubMed:22467853)。
  関連参考文献:
  PMID:22467853
• 細胞内局在: このタンパク質はシグナルペプチドと複数の膜貫通ドメインを持つ小胞体の膜内在性構成要素である。
• 臨床的関連性: DDOSTの変異は先天性糖鎖化異常症と関連しており、ヒトの健康と疾患におけるその重要性が強調されている。
• 分子量: 標準的なDDOSTポリペプチドの計算分子量は約50.8 kDa (UniProt) であるが、成熟タンパク質はSDS-PAGE上で約51 kDa付近に移動する。

実験ガイドと技術的ヒント

• 免疫原（アミノ酸40–300をカバーする組換えタンパク質）はヒトDDOSTのルーメンドメインに対応しており、天然および変性エピトープの両方を認識する抗体を産生する可能性が高い。WBでは、変性および還元条件が適している。
• IHC-Pを行う場合、熱または酵素処理による抗原賦活化は検出感度を向上させる可能性がある。肝臓や膵臓などの既知の陽性対照組織を含めることが推奨される。
• ELISAでは、細胞および組織ライセート中の組換えまたは内因性DDOSTの直接検出または捕捉検出に本抗体を使用できる。マウスおよびラットDDOSTとの交差反応性が報告されているため、各種種における滴定実験が推奨される。
• シグナル最適化には抗体希釈率の経験的決定が必要な場合がある。WBでは1:500–1:2000、IHC-Pでは1:200から開始し、必要に応じて調整する。
• DDOSTは遍在的に発現するER常駐タンパク質であるため、糖鎖化研究のローディングコントロールまたは参照標準として使用できる。

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