WB、IF/ICC、IP、ELISA用抗DHX9/RNAヘリカーゼAポリクローナル抗体 - Q08211

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：DHX9/RNAヘリカーゼAの機能と局在

• DHX9は、RNAヘリカーゼA、DEAHボックスタンパク質9、ロイコフィシン（LKP）、核DNAヘリカーゼII（NDH II）としても知られ、多機能なDEAHボックスRNAヘリカーゼです。
• dsDNA、dsRNA、DNA:RNAハイブリッド、フォーク、Dループ、Rループ、三重鎖DNA、G-四重鎖など、幅広い基質を巻き戻すATP依存性3'→5'ヘリカーゼ活性を有し、進入には3'一本鎖テールを必要とします。ssDNA、ssRNA、poly(A) RNA、環状基質に結合し、TOP2Aを介した超らせん緩和を促進します。 関連文献： PMID:1537828 PMID:20669935 PMID:21561811 PMID:24049074 PMID:12711669
• 転写コアクチベーターとして機能し、RNAポリメラーゼIIと転写因子（BRCA1、CREBBP、RELA、SMN1）を橋渡しするとともに、CDKN2Aプロモーターに結合します。 関連文献： PMID:11038348 PMID:11149922 PMID:11416126
• 転写後の遺伝子制御において多様な役割を果たします。NUP98と協調して選択的スプライシングに関与し、有害な逆向きAluリピートdsRNA構造を解消し、CTEを含む未スプライシングmRNAの核外輸送を促進します。 関連文献： PMID:11402034 PMID:16680162 PMID:28221134 PMID:28355180 PMID:10924507 PMID:9162007
• mRNA翻訳に関与し、5'-UTRのPCEを介して翻訳を促進し、CRDを介した複合体によってMYC mRNAを安定化し、LARP6およびLIN28AとともにコラーゲンおよびLIN28A依存性翻訳を促進します。 関連文献： PMID:16680162 PMID:19029303 PMID:22190748 PMID:21247876
• RISC形成およびRNA媒介遺伝子サイレンシングにおけるsiRNAローディング因子として機能します。 関連文献： PMID:17531811
• 自然免疫において、ロタウイルス由来の短いdsRNAに結合してNLRP9インフラマソームの活性化を誘導し、IL-18の放出およびパイロトーシスを引き起こします。 関連文献： PMID:28636595
• 主に核（核質、核小体）に局在しますが、細胞質、中心体、細胞骨格にも局在し、リン酸化、アセチル化、メチル化、ユビキチン化など広範な翻訳後修飾を受けます。

実験ガイダンスおよび技術上のヒント

• 免疫原はDHX9のアミノ酸329～563に相当し、ヒト、マウス、ラット間で保存されている領域です。この配列はヘリカーゼコアドメイン内に位置し、複数のアイソフォームを検出すると予想されます。
• ウェスタンブロッティングでは、予測分子量は約141 kDaです。十分なタンパク質転写を確保し、適切な分子量マーカーを使用してください。サンプルの種類に応じて、ブロッキングおよび抗体希釈条件を最適化してください。
• 免疫蛍光法/免疫細胞化学では、DHX9は核および細胞質の両方に分布しています。抗原へのアクセス性を維持するために固定・透過化条件を検証し、細胞内構造の共染色の使用を検討してください。
• 免疫沈降では、タンパク質間相互作用を維持するため、プロテアーゼ阻害剤およびホスファターゼ阻害剤を含む最適化された溶解バッファーを使用してください。陰性対照（例：ウサギIgG）は必須です。
• ELISAの性能は精製抗原または細胞ライセートを用いて校正する必要があり、実験上の特異性要件に応じて、関連するDEAHボックスヘリカーゼとの交差反応性を評価できます。

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