抗DKK3ウサギモノクローナル抗体（WB/IF/ICC/ELISA用） - Q9UBP4

コア製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：DKK3の機能と局在

• DKK3（ディッコップフ関連タンパク質3）はREICまたはRIGとしても知られ、Wntアンタゴニストであるディッコップフファミリーに属する分泌型糖タンパク質です。シグナルペプチド、2つのシステインリッチドメイン、およびコイルドコイル領域を含んでいます。
• DKK3はLRP5/6共受容体に結合し、KREMEN膜貫通タンパク質を介してそれらの内在化を促進することで、古典的Wnt/β-カテニンシグナル伝達を拮抗し、Wntリガンドと受容体の相互作用を阻害します。
• 本タンパク質はWnt活性を局所的に調節することで、前後軸のパターン形成、四肢の形態形成、体節形成、眼形成を含む胚発生に重要な役割を果たします。
• 成体組織では、骨恒常性、腫瘍抑制（癌では頻繁に発現が低下する）、アルツハイマー病などの神経変性プロセスに関与することが示唆されています。ただし後者の機能は配列類似性から推定されたものです。
• 亜細胞局在は排他的に細胞外です：DKK3は細胞外空間に分泌され、膜結合または細胞内に存在することはありません。
• 発現量は心臓、脳、脊髄で最も高く、他の組織では低レベルであることから、組織特異的な制御機能を持つことが示唆されます。
• 翻訳後修飾にはN型グリコシル化およびジスルフィド結合形成が含まれます。これらは分泌型システインノットタンパク質に典型的な特徴であり、タンパク質の安定性および活性に影響を与える可能性があります。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原はヒトDKK3のアミノ酸200～350に対応し、コイルドコイルモチーフが豊富なC末端領域を覆っています。この領域により全長DKK3および一部の切断産物を検出できる可能性があります。ご使用の実験系で分子量を確認してください。
• ウエスタンブロット（WB）の場合、予測分子量はアミノ酸配列から計算して約38 kDaです。グリコシル化により、観察されるバンドの移動度がわずかに高くなる可能性があります。適切な対照を使用してください。
• 免疫蛍光法/免疫細胞化学（IF/ICC）の場合、DKK3は分泌タンパク質であるため、細胞内に保持させたい場合はゴルジ体ブロック剤（例：BFA）を添加することで染色が向上する可能性があります。保持させない場合は、ELISAにより細胞上清中の分泌型DKK3を分析することをご検討ください。
• 本抗体はELISA用途での検証が完了しています。アッセイフォーマットに応じて抗原捕捉または検出に使用できます。ご使用のマトリックスで交差反応性試験を実施してください。
• マウスおよびラットとの交差反応性が報告されており、免疫原領域の配列相同性は高いですが、依然として種特異的組織での反応性を検証してください。
• 最適なシグナル対ノイズ比を得るため、常にご自身のアッセイ条件で抗体の力価検定を実施してください。

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