WB、IHC-P、ELISA用 Anti-DNA-PKcs ポリクローナル抗体 - P78527

製品の主要仕様とパラメータ

生物学的背景：DNA-PKcsの機能と局在

• セリン/スレオニンプロテインキナーゼとして、DNA損傷の分子センサーとして機能し、二本鎖切断(DSB)修復とV(D)J組換えに必要なDNA非相同末端結合(NHEJ)に必須。触媒活性にはDNA結合が必要。 関連文献: PMID:11955432, PMID:12649176, PMID:14734805
• XRCC5/XRCC6によってDNA末端にリクルートされ、切断端を保護・整列させ、分解を防ぎ、NHEJによる修復のためにDSBを隔離する。DNA修復タンパク質の局在化の足場として機能。 関連文献: PMID:11955432, PMID:12649176, PMID:14734805
• DNA損傷応答における主要な基質（H2AX ('Ser-139')、p53/TP53、c-Abl/ABL1、アルテミス(DCLRE1C)など）をリン酸化し、その機能を調節する。 関連文献: PMID:14627815, PMID:16046194, PMID:10026262, PMID:10467406, PMID:11889123
• 転写とリボソーム生合成の調節に関与：U3 snoRNAへの結合を介して、小サブユニットプロセソーム内で前駆体rRNAを成熟型18S rRNAに処理することを促進する。 関連文献: PMID:32103174
• CRY1のリン酸化を拮抗し、CRY1タンパク質の安定性を増加させることで概日リズムの調節に寄与する（おそらく間接的なメカニズムによる）。(相同性による推測)
• HDP-RNP複合体を形成し、CGASをリン酸化してそのオリゴマー化を損なうことで、cGAS-STING経路を介した自然免疫応答を調節する。 関連文献: PMID:28712728, PMID:33273464
• 主に核、核小体、細胞質に局在。染色体末端にも存在し、テロメア維持における役割が示唆される。
• キーワード: DNA損傷, DNA修復, DNA結合, キナーゼ, セリン/スレオニンプロテインキナーゼ, 核, 自然免疫, 疾患変異体 (IMD26).

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原はヒトDNA-PKcsのC末端領域（a.a. 3993-4128）に対応する。関連するサンプル系での全長タンパク質の認識を確認すること。
• ウェスタンブロットでは、分子量が大きい（469 kDa）ため、低濃度のSDS-PAGEゲル（例：6％またはグラジエントゲル）と長時間の転写を検討する。適切な対照で特異性を確認すること。
• 免疫組織化学（IHC-P）では、抗原賦活化条件（例：クエン酸バッファーpH 6.0またはTris-EDTA pH 9.0）を最適化し、背景を低減するために複数の濃度をテストすること。
• ELISAアプリケーションでは、様々なコーティング条件下での免疫原または天然タンパク質に対する抗体の反応性を検証すること。
• 交差反応性はヒトで報告されている。必要に応じて他の種との反応性をテストすること。配列相同性が存在する可能性がある。

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