WB、IHC-P、IP、ELISA用 抗DNAトポイソメラーゼI（TOP1）ウサギポリクローナル抗体 - P11387

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：DNAトポイソメラーゼIの機能と局在

• DNAトポイソメラーゼI（TOP1）はTOP1遺伝子にコードされる酵素で、分子量は約91 kDaです（UniProt：P11387）。DNAトポイソメラーゼIとしても知られています。
• TOP1は、DNAの一方の鎖を一時的に切断して共有結合性中間体を形成し、遊離した鎖を回転させた後、切断部位を再結合することで、複製および転写中のDNAの超らせん構造とねじれ応力を軽減します。
• 内皮細胞における組織因子（F3）pre-mRNAの選択的スプライシングを調節し、凝固関連遺伝子発現における役割を示しています。
• TOP1は、BMAL1プロモーター上のROR応答エレメントにおけるクロマチン構造を調節することで概日リズムの制御に寄与し、時計遺伝子の転写に影響を与えます。
• このタンパク質は核に局在し、核小体と核質の両方に存在します。
• TOP1は、他の組織と同様に内皮細胞でも発現します。
• 翻訳後修飾にはアセチル化およびリン酸化が含まれ、染色体再編成におけるがん原遺伝子として関与することが示されています。
• リン酸化タンパク質であり、ユビキチン化およびイソペプチド結合形成を受けるため、複雑な制御機構のもとにあることが示唆されます。

実験ガイダンスおよび技術上のヒント

• 免疫原はN末端領域（アミノ酸1～100）由来の合成ペプチドであるため、この抗体は全長タンパク質を認識する可能性が高いです。ウエスタンブロットでは91 kDa付近にバンドが現れることが予想されます。適切なローディングコントロールの使用とブロッキング条件の最適化を検討してください。
• IHC-Pでは、エピトープを露出させるために抗原賦活化法が必要になる場合があります。内皮細胞が豊富な組織など、既知の陽性組織で染色を検証してください。
• 免疫沈降では、TOP1を発現する関連細胞の溶解液における捕捉効率を確認し、適切な陰性コントロール（例：IgG）を使用してください。
• ELISAでは、この抗体を捕捉試薬または検出試薬として使用できます。必要に応じて適合する抗体と組み合わせ、組換えタンパク質標準品を用いて感度を検証してください。

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