WB、ChIP、ELISA用 抗DNMT3B ウサギモノクローナル抗体 - Q9UBC3

製品の中核仕様とパラメータ

生物学的背景：DNMT3Bの機能と局在

• DNMT3BはDNA (シトシン-5)-メチルトランスフェラーゼであり、デノボDNAメチル化を触媒し、胚発生や細胞分化に重要なメチル化パターンを確立します。
• 核小体DNAのコア領域内を優先的にメチル化し、DNAメチル化とヒストン修飾を協調させてクロマチン構造と遺伝子発現を調節する可能性があります。
• 複数の選択的スプライシングアイソフォームが存在します。アイソフォーム1、3、およびおそらく2は機能的ですが、アイソフォーム4と5は保存されたメチルトランスフェラーゼモチーフを欠き、おそらく触媒活性がありません。
• 触媒作用を超えて、DNMT3BはCBX4およびZHX1と相互作用し、メチル化活性とは独立して遺伝子サイレンシングを仲介する転写コリプレッサーとして機能します。
• DNMT1および因子CTCFL/BORISと関連して、DNMT3BはBAG1プロモーターにおけるヒストンH3K4およびH3K9ジメチル化を調節し、転写活性化に寄与します。
• DNMT3Bは体細胞におけるDUX4遺伝子のサイレンシングに必要です。その調節異常は顔面肩甲上腕型筋ジストロフィー4型（FSHD4）に関連しています。 関連参考文献: PMID:27153398
• 核に局在するDNMT3Bは広く発現しており、胎児の肝臓、心臓、腎臓、胎盤で高レベル、脳や骨格筋などの成人組織では低レベルです。アイソフォーム1は脳、骨格筋、PBMCには存在しません。
• リン酸化やシトルリン化などの翻訳後修飾は、DNMT3Bの安定性と活性に影響を与える可能性があります。また、ユビキチン様結合の標的でもあります。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原はヒトDNMT3Bのアミノ酸206–360に対応し、PWWPドメインの一部を含む領域です。検出を確実にするために、サンプル系における機能性アイソフォームの発現を確認してください。
• ウェスタンブロット（WB）では、約96 kDa付近にバンドが期待されます。一部のアイソフォームは異なるサイズで移動する可能性があるため、DNMT3Bノックアウトまたはノックダウンコントロールで特異性を検証してください。
• ChIPでは、DNMT3Bは核クロマチン関連タンパク質であるため、架橋、断片化、抗体濃度を注意深く最適化し、適切な陰性領域を含めてください。
• ELISAでは、組換え免疫原を用いて標準曲線を作成し、直線性を評価してください。この抗体は、マッチしたペアを用いたサンドイッチELISAにおける捕捉または検出にも使用できます。
• DNMT3Bは多くの組織で低レベルで発現しているため、高感度検出には核濃縮や高タンパク質ローディングを検討してください。
• 非ヒト種との交差反応性は報告されていません。ヒトサンプル以外で使用する場合は、関連する系で検証してください。

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