WBおよびELISA用抗ドーパミンβヒドロキシラーゼウサギモノクローナル抗体 - P09172

主要な製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：ドーパミンβ-ヒドロキシラーゼの機能と局在

• タンパク質の同一性：ドーパミンβ-ヒドロキシラーゼ（DBH）は、ドーパミンβ-モノオキシゲナーゼとも呼ばれ、ヒトではDBH遺伝子によってコードされ、銅タイプIIアスコルビン酸依存性モノオキシゲナーゼファミリーに属します。
• 主要な機能：DBHは、ドーパミンをノルアドレナリン（ノルエピネフリン）に水酸化する反応を触媒し、これはカテコールアミン生合成経路における基本的な段階であり、それによって神経伝達物質のバランスを調節します。
• 遺伝子ファミリー：DBHはモノオキシゲナーゼファミリーのメンバーです。ヒトゲノム内には密接に関連したパラログは記述されておらず、カテコールアミン産生におけるその独自の役割が強調されています。
• 細胞内局在：DBHは主に分泌小胞の腔内および膜、特にクロマフィン顆粒に局在していますが、エキソサイトーシス後に細胞外空間へ分泌されることもあります。
• 翻訳後修飾および補因子：糖タンパク質として、DBHは広範なN-グリコシル化を受け、構造的安定性に不可欠なジスルフィド結合を含み、酸化還元酵素活性に必要な補因子として銅イオンとビタミンC（アスコルビン酸）を必要とします。
• 分子量：非グリコシル化前駆体の計算された分子量は約69,065 Daであり、還元条件下でのSDS-PAGEで観察される〜69 kDaのバンドと一致しています。
• 疾患との関連：DBHの遺伝的変異および突然変異は、起立性低血圧やその他の障害と関連しており、その臨床的関連性を示しています（UniProtKBのキーワード「Disease variant」で示されています）。
• 追加情報：DBHは分泌タンパク質およびリファレンスプロテオームエントリとしても特定されており、その3D構造が決定されており、直接的なタンパク質配列決定データが利用可能であり、その生化学的特徴付けを強固にしています。

実験的ガイダンスと技術的なヒント

• ウェスタンブロットアプリケーション：この抗体は、ヒトサンプルで約69 kDaのバンドを検出します。還元条件を使用し、副腎髄質や交感神経ニューロンなど、DBHを発現することが知られている組織または細胞タイプでシグナルを検証することを検討してください。
• 免疫原の設計：アミノ酸100〜250をカバーする組換え断片は、触媒ドメイン内の保存領域に対応しています。この抗体は、溶解物に存在する場合、成熟した腔内型および膜結合型前駆体の両方を認識する可能性があります。
• ELISAの考慮事項：サンドイッチイムノアッセイを開発する際、適切な捕捉抗体とのペアリング適合性をテストしてください。DBHは分泌されるため、サンプルタイプ（血漿、コンディションドメディウムなど）の慎重な選択とプレインキュベーションステップにより、検出が向上する可能性があります。
• 交差反応性：この抗体はヒトDBHと反応することが記録されていますが、他の種またはDBHアイソフォームとの潜在的な交差反応性は、特に定量的アプリケーションを意図している場合、独立して検証する必要があります。
• サンプル調製：DBHは小胞膜と腔内の両方に局在するため、固相アッセイで最適なシグナルを得るために、可溶化戦略（穏やかな界面活性剤など）または細胞分画が必要になる場合があります。

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