ウエスタンブロットおよびELISA用 Anti-EGFR (Phospho Y1068) ウサギモノクローナル抗体 - P00533

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：EGFRの機能と局在

• EGFRは受容体型チロシンキナーゼであり、EGFファミリーリガンドに結合し、受容体の二量体化と、Y1068を含む重要な細胞質内残基の自己リン酸化を引き起こし、下流シグナル伝達を活性化します (PubMed:10805725, PubMed:27153536, PubMed:2790960)。 関連文献: PMID:10805725, PMID:27153536, PMID:2790960
• リン酸化された受容体はGRB2などのアダプタータンパク質をリクルートし、少なくとも4つの主要なシグナル伝達カスケード（RAS-RAF-MEK-ERK、PI3K-AKT、PLCγ-PKC、およびSTATモジュール）の活性化につながります (PubMed:27153536)。 関連文献: PMID:27153536
• EGFRは、RGS16やMUC1などの他のタンパク質を直接リン酸化し、EGFシグナル伝達をGPCRシグナル伝達および細胞接着経路に関連付けます (PubMed:11602604, PubMed:11483589)。さらに、NF-kappa-Bシグナル伝達カスケードを活性化することができます (PubMed:11116146)。 関連文献: PMID:11602604, PMID:11483589, PMID:11116146
• CCDC88A/GIVとの相互作用はEGFRを細胞膜に保持し、細胞移動を促進します (PubMed:20462955)。 関連文献: PMID:20462955
• 細胞内では、EGFRは細胞膜、小胞体、ゴルジ装置、核、エンドソームに局在し、分泌されることもあります。この動的な分布は、その多面的なシグナル伝達機能を支えています。
• 広範に発現しており、アイソフォーム2は卵巣がんでも検出されます。EGFRはまた、肝細胞におけるC型肝炎ウイルス（HCV）侵入の宿主受容体としても機能します。
• 重要な翻訳後修飾には、リン酸化（特にリガンド結合後のY1068）、グリコシル化、ユビキチン化、パルミトイル化が含まれ、そのキナーゼ活性とシグナル伝達持続時間に不可欠です。

実験ガイダンスおよび技術的ヒント

• 免疫原はY1068領域に対応する合成リン酸化ペプチドです。WBでは、リン酸化状態を保持するために、溶解バッファーにホスファターゼ阻害剤を含めることを確認してください。
• ELISAでは、リン酸化ペプチド抗原をコーティングすることで抗体の特異性を評価するのに役立ちます。非リン酸化ペプチドを陰性対照として使用できます。
• この抗体はヒトおよびマウスEGFRとの交差反応性を示しているため、両種の研究に適用できます。ただし、対象となるサンプル系での検証を推奨します。
• WBシグナルを正規化するために、リン酸化状態の影響を受けないローディングコントロールの使用を検討してください。
• 分子量が134 kDaであることを考慮し、ゲルの濃度および転写条件を適切に調整してください。

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