WB、IF/ICC、IHC-P、ELISA用抗eIF2αウサギモノクローナル抗体 - P05198

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：eIF2αの機能と局在

• EIF2S1遺伝子にコードされるeIF2αは、eIF-2AまたはeIF-2alphaとしても知られる真核生物翻訳開始因子2（eIF2）複合体のαサブユニットです。
• eIF2複合体はGTPおよび開始tRNAと三者複合体を形成し、40Sリボソームサブユニットに結合してmRNAの結合を促進し、43S開始前複合体を形成します。60Sサブユニットが結合した後、GTP加水分解によってeIF2-GDP複合体が生成され、再利用にはeIF2Bが触媒するヌクレオチド交換が必要となります。 関連文献： PMID:16289705 PMID:38340717
• eIF2αは統合的ストレス応答（ISR）の中心的な制御因子です。ストレス感知キナーゼ（EIF2AK1/HRI、EIF2AK2/PKR、EIF2AK3/PERK、EIF2AK4/GCN2）によるリン酸化によって、eIF2αは全般的なタンパク質合成阻害因子へと変換され、キャップ依存的翻訳を抑制する一方、転写活性化因子ATF4やQRICH1など、ISR特異的mRNAの翻訳を促進します。 関連文献： PMID:19131336 PMID:33384352 PMID:38340717
• ミトコンドリア損傷が生じると、リン酸化eIF2αはミトコンドリア表面へ再局在化し、PRKN非依存的なマイトファジーを活性化します。 関連文献： PMID:38340717
• 細胞内では、eIF2αは細胞質、サイトゾル、ストレス顆粒、ミトコンドリアに存在し、翻訳およびストレスシグナル伝達における役割と一致しています。
• このタンパク質はアセチル化およびリン酸化を受け、開始因子、リン酸化タンパク質、RNA結合タンパク質に分類されます。

実験ガイダンスおよび技術上のヒント

• 免疫原はヒトeIF2αのN末端領域（アミノ酸1～315）に相当し、eIF2複合体の形成およびリン酸化部位に重要なドメインを含みます。この設計により、種を越えた幅広い反応性と、リン酸化型および非リン酸化型の両方の認識が可能になる場合があります。
• ウエスタンブロット（WB）では、予測分子量は約36 kDaです。適切なゲル濃度の使用を検討し、リン酸化による移動度シフトの可能性を観察するため、ストレス誘導剤（タプシガルギン、ツニカマイシンなど）で処理した細胞溶解液など、関連する対照を含めてください。
• 免疫蛍光（IF/ICC）および免疫組織化学（IHC-P）では、通常条件およびストレス条件下で、細胞質およびストレス顆粒における染色パターンを検証してください。適切な透過化処理および抗原賦活化プロトコルを確実に実施してください。
• マウスおよびラットとの交差反応性は、げっ歯類モデルへの適合性を示唆します。ただし、配列相同性を確認し、使用する特定の実験系で検証してください。

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