WB、IF/ICC、ELISA用 Anti-EIF3A ポリクローナル抗体 - Q14152

中核製品仕様とパラメータ

生物学的背景: EIF3Aの機能と局在

• EIF3Aは真核生物翻訳開始因子3（eIF-3）複合体のRNA結合成分であり、タンパク質合成開始の複数段階に必要とされる。 関連参考文献: PMID:17581632, PMID:25849773
• EIF3Aを含むeIF-3複合体は、eIF-1、eIF-1A、eIF-2:GTP:Met-tRNAi、およびeIF-5の40Sリボソームへのリクルートを促進し、43S前開始複合体（43S PIC）を形成する。 関連参考文献: PMID:17581632, PMID:25849773
• EIF3Aは、mRNAの43S PICへのリクルートとAUG認識のためのスキャンを刺激し、終了後リボソーム複合体の分解とリサイクルに必要であり、40S-60Sサブユニットの早期結合を防ぐ。 関連参考文献: PMID:11169732, PMID:17581632
• このサブユニットは、細胞増殖、分化、アポトーシスに関与する特定のmRNAサブセットを標的とし、その翻訳を開始する。異なるRNAステムループ結合様式を用いて、翻訳の活性化または抑制を発揮する。 関連参考文献: PMID:25849773, PMID:27462815
• 微生物感染時、EIF3AはHCV、PV、EV71、BEVなどのタイプ1ウイルス内部リボソーム進入部位（IRES）での開始に必須であり、FCV VP2翻訳のためのリボソーム終了-再開始イベントにも役割を果たす。 関連参考文献: PMID:23766293, PMID:24357634, PMID:18056426
• EIF3Aは細胞質に局在する。
• 翻訳後修飾にはアセチル化とリン酸化が含まれる。このタンパク質はコイルドコイルおよびRNA結合モチーフを含み、宿主-ウイルス相互作用に関与する。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原は、ヒトEIF3AのN末端1-250番目のアミノ酸に対応する。相補的な検出試薬の設計やエピトープマッピング研究を行う際は、これを考慮すること。
• ウェスタンブロット（WB）では、予測分子量は約167 kDaである。還元SDS-PAGE条件を使用し、特定の細胞または組織ライセートで観察されるバンドを検証すること。
• 免疫細胞化学/免疫蛍光（IF/ICC）では、4%パラホルムアルデヒドによる固定と0.1-0.3% Triton X-100による透過化処理が一般的に適している。使用する細胞モデルでの最適条件を確認すること。
• ELISAを使用する場合は、適切なコーティングバッファーと検出システムを最適化する必要がある。サンドイッチELISA開発のためには、検証済みの捕捉抗体との併用を検討すること。

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