WB、IF/ICC、ELISA用抗eIF3Bウサギモノクローナル抗体 - P55884

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：eIF3Bの機能と局在

• 真核生物翻訳開始因子3サブユニットB（eIF3B）は、PRT1、EIF3S9、eIF3-p110、またはeIF3-p116としても知られ、真核生物翻訳開始因子3（eIF-3）複合体の中核構成因子です。eIF-3複合体は、細胞増殖、細胞周期、分化、アポトーシスに関与する一部のmRNAを標的として翻訳を開始することにより、タンパク質合成において重要な役割を果たします。
• eIF-3複合体は、翻訳開始における複数の段階に必要です。40Sリボソームサブユニットと結合して開始因子のリクルートを促進し、mRNAのリクルートおよびAUG認識に向けたスキャニングを促進します。また、翻訳終結後のリボソーム複合体の解離と再利用にも不可欠であり、サブユニットの早期結合を防ぎます。 関連文献： PMID:17581632 PMID:9388245
• eIF3Bは重要なRNA結合サブユニットであり、異なるRNAステムループ結合様式を用いることで、eIF-3複合体が細胞増殖関連mRNAの翻訳を特異的に制御できるようにします。翻訳活性化因子または抑制因子のいずれとしても機能します。 関連文献： PMID:25849773
• ネコカリシウイルス（FCV）感染において、eIF3BはウイルスVP2タンパク質の翻訳を指示するリボソームの終結・再開始イベントに関与しており、宿主と病原体の相互作用における役割を示しています。 関連文献： PMID:18056426
• 細胞内では、eIF3Bは主に細胞質に存在し、ストレス顆粒に局在することがあります。ストレス顆粒は細胞ストレス条件下で形成される膜を持たない細胞小器官であり、mRNAを一時的に貯蔵し、翻訳を制御します。
• eIF3Bはアセチル化やリン酸化などの翻訳後修飾を受け、これらの修飾によって翻訳開始機構内での活性や相互作用が調節される可能性があります。
• 構造的には、eIF3BはWDリピートドメインを含み、WDリピートタンパク質ファミリーに属します。このファミリーは、タンパク質間相互作用の促進やプロペラ様構造の形成に関与することが知られており、複数サブユニットからなるeIF-3複合体の組み立てにおけるeIF3Bの役割と一致します。

実験ガイダンスおよび技術上のヒント

• ウェスタンブロットでは、完全長eIF3Bに相当する約93 kDaの主要バンドが予想されます。ローディングコントロールの使用を検討し、サンプル間でシグナルを正規化してください。
• 免疫蛍光（IF/ICC）では、eIF3Bは細胞質分布を示します。Triton X-100やサポニンなどの界面活性剤による透過処理が必要であり、細胞ストレス条件下では染色がストレス顆粒に局在する場合があります。
• 本抗体はマウスおよびラットの相同体と交差反応します。ただし、これらの種で使用する場合は、適切な陽性および陰性コントロールを用いて結合特異性と性能を検証することを推奨します。
• ELISAでは、最適な使用濃度を決定するために抗体を滴定してください。アッセイの要件や感度に応じて、直接ELISAまたはサンドイッチELISA形式を検討してください。
• 免疫原は組換え断片（アミノ酸101～200）に相当するため、本抗体はN末端領域の保存された線状エピトープを認識する可能性が高く、変性タンパク質を必要とする用途に適していると考えられます。ただし、天然構造の認識については実験的に確認する必要があります。

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