抗eIF4Aウサギポリクローナル抗体 (WB, IF/ICC, ELISA用) - P60842 / Q14240 / P38919

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：eIF4Aの機能と局在

• eIF4A-1 (P60842) はDDX2Aとも呼ばれ、ATP依存性RNAヘリカーゼであり、eIF4F翻訳開始複合体のコアサブユニットです。
• eIF4Fの一部として、eIF4A-1はmRNAの5'-UTRにおけるRNA二次構造を巻き戻すことでキャップ依存的翻訳開始に関与し、リボソームの結合と開始コドンのスキャンを可能にします。
  関連文献: PMID:20156963
• このヘリカーゼ活性は効率的なタンパク質合成に不可欠であり、細胞の増殖と成長に寄与しています。
• eIF4Aファミリーは、高度に相同な3つのメンバー（eIF4A-1 (P60842)、eIF4A-2 (Q14240)、eIF4A-3 (P38919)）で構成されており、すべて保存されたDEADボックスヘリカーゼドメインを共有しています。
• 細胞内局在には、細胞質、核周囲領域、細胞膜、および細胞ストレス下でリクルートされるストレス顆粒が含まれます。
• アセチル化、リン酸化、ユビキチン化などの翻訳後修飾が、その活性と安定性を制御しています。
• eIF4A-1は宿主とウイルスの相互作用にも関与しており、特定のウイルスの複製において役割を果たしています。

実験ガイダンスおよび技術的ヒント

• 免疫原はヒトeIF4A-1のN末端領域（aa 1-100）をカバーする合成ペプチドです。得られるポリクローナル抗体は、配列の保存性が高いため、複数のeIF4Aファミリーメンバーを認識する可能性があります。関連する細胞または組織ライセートにおいて、標的アイソフォームに対する特異性を確認することを検討してください。
• ウェスタンブロッティングでは、eIF4A-1に対して約46 kDa付近に主要なバンドが期待されます。また、eIF4A-2（約46 kDa）およびeIF4A-3（約48 kDa）に対応する追加のバンドが見られる可能性があります。適切なポジティブコントロールおよびネガティブコントロールを使用してください。
• 免疫蛍光染色/ICCでは、細胞質および核に染色が観察される場合があり、ストレス条件下では核周囲領域やストレス顆粒に濃縮される可能性があります。ストレス顆粒形成を誘導するための細胞前処理（例：亜ヒ酸塩を使用）を局在研究に利用できます。
• ELISAの場合、本抗体はサンドイッチ法におけるキャプチャーまたは検出試薬として適していますが、他のeIF4Aファミリータンパク質との交差反応性は実験的に評価する必要があります。
• ポリクローナル抗体であるため、ロット間の一貫した性能を検証してください。定量アッセイには内部標準の使用を検討してください。

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