IHC-P、IF/ICC、ELISA用抗EP300ポリクローナル抗体 - Q09472

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：EP300の機能と局在

• EP300は、p300/CBPファミリーに属する多ドメイン性転写共役活性化因子であるヒストンアセチルトランスフェラーゼp300をコードします。このタンパク質には、中央部にブロモドメインおよびヒストンアセチルトランスフェラーゼ（HAT）ドメインが含まれています。
• p300は、ヌクレオソーム中の4つすべてのコアヒストンをアセチル化できるヒストンアセチルトランスフェラーゼとして機能し、それによって転写活性化のためにクロマチンをエピジェネティックに標識します（PubMed:23415232、PubMed:23934153、PubMed:8945521）。 関連文献： PMID:23415232 PMID:23934153 PMID:8945521
• 具体的には、ヒストンH3のLys-18、Lys-27、Lys-122、およびヒストンH4のLys-5、Lys-12をアセチル化します。これらの修飾はヌクレオソームの不安定化を促進し、転写開始を高めます（PubMed:21131905、PubMed:23911289、PubMed:23415232、PubMed:37731000）。 関連文献： PMID:21131905 PMID:23911289 PMID:23415232 PMID:37731000
• p300はヒストン以外にも、転写因子（STAT3、FOXO1など）、代謝酵素（PKM2、PCK1）、DNA修復タンパク質など、数多くの非ヒストン基質をアセチル化し、それらの活性、安定性、局在を調節します（PubMed:15653507、PubMed:15890677、PubMed:24120661、PubMed:24939902）。 関連文献： PMID:15653507 PMID:15890677 PMID:24120661 PMID:24939902
• このタンパク質は核、細胞質、染色体に局在し、転写、シグナル伝達、クロマチン構造の維持における多様な役割を反映しています。
• p300はCLOCKまたはNPAS2と結合することで概日リズムの調節に関与し、時計制御遺伝子のプロモーターにおけるヒストンアセチル化をリズミカルに誘導します（PubMed:14645221）。 関連文献： PMID:14645221
• EP300は複数の疾患と関連しています。染色体再構成および変異は、知的障害（Rubinstein-Taybi症候群2型）やさまざまながんと関連しています。また、このタンパク質はアデノウイルスE1AやHIV-1 Tatなどのウイルスタンパク質とも相互作用します。

実験ガイダンスおよび技術的ヒント

• 免疫原はヒトEP300のN末端270アミノ酸で構成され、タンパク質間相互作用に関与するTAZ1ドメインを含んでいます。この領域はEP300に固有であり、近縁のCREBBPタンパク質との交差反応性を低減できる可能性があります。
• 免疫組織化学（IHC-P）および免疫蛍光（IF/ICC）では、EP300が核および細胞質に局在し、分子量が大きい（約264 kDa）ことを考慮し、抗原賦活化条件および抗体濃度の最適化を検討してください。
• ELISAは定量的な検出プラットフォームとして使用できます。特異性を確保するため、組換えEP300タンパク質またはEP300を発現する細胞溶解液を用いてアッセイを検証してください。
• EP300は複数のドメインを持つ大きなタンパク質であるため、変性ウェスタンブロット（WB）では、全長バンドを検出するために転写時間を延長し、ブロッキングを慎重に行う必要がある場合があります。

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