WB、IP、ELISA用抗EPB41ウサギポリクローナル抗体 - P11171

製品の主な仕様およびパラメータ

生物学的背景：EPB41の機能と局在

• プロテイン4.1（EPB41、4.1R）は多機能な構造タンパク質であり、もともとは赤血球膜骨格の主要構成成分として同定されました。
• スペクトリン–アクチンネットワークを安定化し、それによって赤血球の機械的安定性および変形能を調節します。
• 非赤血球系細胞では、EPB41は後期におけるダイニン–ダイナクチン複合体およびNUMA1の細胞皮質への動員に必要であり、適切な有糸分裂の進行を保証します（PubMed:23870127）。
  関連文献：
  PMID:23870127
• EPB41はカルモジュリンと相互作用し、アクチン、スペクトリン、その他の膜結合タンパク質に対する結合部位を有します。また、広範な選択的スプライシングを受け、複数のアイソフォームを生成します。
• リン酸化やO-グリコシル化などの翻訳後修飾により、細胞骨格および膜との結合が調節されます。
• 細胞内局在には細胞質、細胞皮質、細胞骨格、核が含まれ、その多様な機能的役割を反映しています。
• EPB41の変異は、遺伝性楕円赤血球症および遺伝性熱性赤血球異形成症に関連しており、これらは形態異常および脆弱な赤血球を特徴とする溶血性貧血です。
• このタンパク質の分子量は約97 kDaです。

実験ガイダンスおよび技術上のヒント

• ウェスタンブロッティングでは、約97 kDa付近にバンドが検出されることを予想してください。赤血球溶解液または関連する有核細胞株で発現を確認してください。
• 免疫沈降を行う際は、細胞骨格との相互作用を保持できる適切な溶解バッファーを使用してください。溶解液のプレクリアのため、低速遠心分離の工程を検討してください。
• 免疫原はアミノ酸700～800領域由来のペプチドであるため、siRNAを介したノックダウン、またはEPB41を発現しない細胞株との比較により特異性を確認できます。
• ELISAでは、コーティング条件を最適化し、標準物質として組換えタンパク質断片の使用を検討してください。
• このポリクローナル抗体は、選択的スプライシングにより複数のEPB41アイソフォームを認識する可能性があります。質量分析またはアイソフォーム特異的プローブにより、検出されたバンドの同一性を確認してください。

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