WB、IF/ICC、ELISA用 抗EPHA4 ポリクローナル抗体 - P54764

製品の主要仕様とパラメータ

生物学的背景：EPHA4の機能と局在

• エフリンタイプA受容体4 (EPHA4、別名EK8、SEK、HEK8、TYRO1) は、受容体型チロシンキナーゼであるEph受容体ファミリーの一員であり、EPHA4遺伝子によってコードされます。
• EPHA4は隣接する細胞上の膜固定型エフリンリガンドに結合し、双方向性シグナル伝達（受容体を介した順方向とリガンドを介した逆方向）を開始します。これは特異的にプロミスキャスであり、GPI結合型エフリンAリガンド（例：EFNA1）と膜貫通型エフリンBリガンド（例：EFNB3）の両方によって活性化されます。
• 発生中の神経系において、EPHA4は軸索ガイダンス（皮質脊髄路投射の確立を含む）に重要な役割を果たし、神経筋回路形成時に運動ニューロンと感覚ニューロンの軸索を分離します。
• 発生過程を超えて、EPHA4は成体脳におけるシナプス可塑性を調節し、損傷後の軸索再生を抑制します。また、中枢神経系の血管形成にも寄与します。
• 細胞内局在としては、EPHA4は細胞膜、軸索および樹状突起の投射、シナプス後膜密度部、初期エンドソーム、接着結合に局在します。
• EPHA4は組織全体に遍在的に発現し、胸腺上皮の発達や蝸牛柱細胞の分離を含む多様な細胞間シグナル伝達事象に関与します。CAPRIN1をリン酸化して膜のない区画の形成を促進することができます（相同性による）。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原はN末端細胞外ドメイン（アミノ酸20–100）にまたがるため、この抗体は全長受容体を認識すると予想され、可溶性フラグメントや切断された細胞外ドメインを検出する可能性があります。
• 還元条件下でのWBでは、ヒト、マウス、またはラットの組織/細胞株ライセートにおいて約110 kDaで移動するバンドを予期してください。特異性の検証には適切な陽性対照と陰性対照を実行してください。
• IF/ICCでは、EPHA4は通常、原形質膜と神経突起の染色を示します。エピトープのアクセシビリティと形態を保持するために、最適化された固定（例：4% PFA）と透過処理を使用してください。
• ELISAアプリケーションでは、細胞外エピトープ認識をサンドイッチアッセイやリガンド結合競合研究に活用できます。可能であれば、組換えEPHA4タンパク質を用いてアッセイを検証してください。
• EPHA4は高度に保存されているため、他のEph受容体との交差反応性を排除できません。検出されたバンドの同一性は、可能であればsiRNAノックダウンまたはKOモデルによって確認する必要があります。

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