抗ERCC8ウサギポリクローナル抗体（WB、ELISA用） - Q13216

製品コア仕様・パラメータ

生物学的背景：ERCC8の機能と局在

• ERCC8（別名：CSA、CKN1、UVSS2）はDNA切除修復タンパク質であり、CSA複合体の基質認識コンポーネントです。
• CSA複合体はDCX（DDB1-CUL4-X-box）E3ユビキチンタンパク質リガーゼ複合体であり、転写連鎖型ヌクレオチド除去修復（TC-NER）に機能し、活性遺伝子の転写鎖からRNAポリメラーゼIIをブロックする損傷を迅速に除去します。 関連文献: PMID:12732143 PMID:16751180 PMID:16964240
• 損傷で停止したRNAポリメラーゼIIに動員されると、CSA複合体はPol IIサブユニットPOLR2A/RPB1のLys-1268部位のユビキチン化を媒介します。これはRNAポリメラーゼIIの安定性を制御し、TFIIHの動員による損傷切除を開始する重要な工程です。 関連文献: PMID:12732143 PMID:16751180 PMID:16964240
• CSA複合体はまた、UV依存的にERCC6/CSBのユビキチン化とプロテアソームによる分解を促進します。これは修復後のRNA合成回復に不可欠です。 関連文献: PMID:16751180
• ERCC8は非相同末端結合（NHEJ）によるDNA二重鎖切断（DSB）修復に関与します。 関連文献: PMID:29545921
• ERCC8は核、特に染色体と核マトリックスに局在します。
• WDリピートタンパク質として、ERCC8は複数のWD40ドメインを含み、変異は小人症、難聴、光過敏性を特徴とするコケイン症候群と関連します。
• ERCC8は選択的スプライシングを受け、リン酸化タンパク質であり、翻訳後修飾を受けます。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 使用している免疫原は、ヒトERCC8のC末端領域（アミノ酸300-396）に対応する合成ペプチドです。この設計により、標的タンパク質に対する特異性が向上する可能性があります。
• ウェスタンブロッティング（WB）では、適切な陽性コントロールと陰性コントロールを用いて抗体を検証してください。推定分子量44kDaの位置で、ヒトおよびマウスの細胞溶解液中の内在性ERCC8を検出できます。
• ELISAでは、適切な感度を得るためにコーティング抗原と抗体希釈率を最適化し、対応する検出システムと組み合わせて使用してください。
• シグナルが弱い、または検出されない場合は、異なるブロッキングバッファー、抗体インキュベーション時間、または溶解液調製方法を試してみることを推奨します。ウェスタンブロッティングでは一般的に、熱によるエピトープ賦活は必要ありません。

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