WB、ELISA用 Anti-FBXL5 ポリクローナル抗体 - Q9UKA1

中核製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：FBXL5の機能と局在

• FBXL5（F-box/LRR-repeat protein 5）はSCF（SKP1-cullin-F-box）E3ユビキチン-タンパク質リガーゼ複合体の構成要素です。IREB2/IRP2をユビキチン化および分解の標的とすることで、鉄恒常性を調節します。 関連参考文献: PMID:19762596, PMID:19762597
• N末端ヘメリトリン様（Hr）ドメインは、鉄センサーとして機能する二鉄金属中心を含みます。低鉄条件下ではFBXL5は不安定であり、鉄結合によりタンパク質が安定化します。 関連参考文献: PMID:19762596, PMID:19762597
• C末端ドメインは、酸化還元感受性の[2Fe-2S]クラスターを含み、酸化によりFBXL5が酸素依存的にIRP2を分解のためにリクルートできるようになります。 関連参考文献: PMID:32126207
• FBXL5はまた、ダイナクチン複合体構成要素DCTN1をユビキチン化し、その分解を促進します。 関連参考文献: PMID:17532294
• 核内では、FBXL5は転写因子SNAI1をユビキチン化し、そのDNA結合を阻害し分解を促進します。 関連参考文献: PMID:24157836
• FBXL5は、DNA修復タンパク質NABP2の分解を仲介することで、DNA損傷応答を負に調節します。 関連参考文献: PMID:25249620
• 主に細胞質と核周辺領域に局在しますが、核との間をシャトルします。そのドメインにはロイシンリッチリピートと鉄-硫黄クラスターが含まれます。
• プロテオミクス同定およびリファレンスプロテオームデータが示すように、選択的スプライシングにより複数のアイソフォームが産生されます。

実験ガイダンスおよび技術的ヒント

• 免疫原はアミノ酸1–310をカバーし、これはヒト、マウス、ラット間で進化的に保存されたN末端ヘメリトリン様ドメインおよびF-boxドメインに対応します。この領域が観察される交差反応性の原因である可能性が高いです。
• ウェスタンブロッティング（WB）では、約79 kDaの理論分子量（UniProt）または供給業者が報告する79 kDaを考慮してください。特定のサンプルマトリックスでのバンドサイズを確認し、適切なコントロール（例：ノックダウンまたはノックアウトリセート）を使用してシグナル特異性を検証してください。
• ELISAアプリケーションでは、ポリクローナル抗体の性質上、天然および変性標的タンパク質の両方を検出できる可能性があります。コーティングおよび検出条件を経験的に最適化してください。
• FBXL5は選択的スプライシングを受けるため、WBで複数のバンドが検出される可能性があることに注意してください。関連する組織または細胞株における抗体の反応性プロファイルを検証してください。
• あらゆるポリクローナル抗体と同様に、ロット間の一貫性を確認する必要があり、アッセイで高い特異性が要求される場合は、事前吸収試験の実施をお勧めします。

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