WB、IHC-P、IF/ICC、ELISA用抗FGD1ポリクローナル抗体 - P98174

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：FGD1の機能と局在

• FGD1（FYVE、RhoGEFおよびPHドメイン含有タンパク質1）は、faciogenital dysplasia 1タンパク質またはZFYVE3としても知られ、小型GTPaseであるCDC42のグアニンヌクレオチド交換因子（GEF）です。
• GDPをGTPに交換する反応を触媒することでCDC42を活性化し、アクチン細胞骨格や細胞形状、さらにラメリポディアや膜ラッフルなどの細胞突起の形成を制御します。
• このタンパク質はFYVE、RhoGEF（DH）、PHドメインを含みます。FYVEドメインはホスファチジルイノシトール3-リン酸に結合し、DH-PHモジュールはヌクレオチド交換活性を媒介します。
• FGD1は細胞質に局在し、細胞骨格と結合します。特にラメリポディアや膜ラッフルに存在し、細胞骨格のリモデリングにおける役割と一致しています。
• 胎児の心臓、脳、肺、腎臓、胎盤で発現し、成人組織では心臓、脳、肺、膵臓、骨格筋などで発現量が低くなっています。
• FGD1は遍在的に発現し、リン酸化されるタンパク質であり、「細胞突起」、「細胞質」、「細胞骨格」、「グアニンヌクレオチド放出因子」などのキーワードに分類されます。
• FGD1の変異は、頭蓋顔面、骨格、生殖泌尿器系の異常を特徴とするX連鎖性疾患である顔性器異形成（Aarskog-Scott症候群）を引き起こします。

実験ガイダンスおよび技術的ヒント

• 免疫原はヒトFGD1のアミノ酸700～800内の配列に対応します。マウスおよびラットのオルソログとこの領域をアラインメントし、エピトープの保存性と予想される交差反応性を確認してください。
• ウェスタンブロットでは、予測分子量は約107 kDaです。大きなタンパク質に適した泳動および転写条件を最適化し、適切な陽性対照を用いてバンドの特異性を検証してください。
• IHC-PおよびIF/ICCでは、FGD1が細胞質および細胞骨格に局在することを考慮してください。透過化および固定プロトコルを適宜調整し、ラメリポディアや膜ラッフルでシグナルが強く検出される可能性があります。
• ELISA：間接法またはサンドイッチ法における抗体または抗原の最適なコーティング濃度を決定し、組換えタンパク質または細胞溶解液を用いた適切なバリデーションを行ってください。

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