WB、IHC-P、IF/ICC、IP、ELISA用抗FTOウサギモノクローナル抗体 - Q9C0B1

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：FTOの機能と局在

• FTO（脂肪量・肥満関連タンパク質）は、RNA脱メチル化酵素として機能するα-ケトグルタル酸依存性ジオキシゲナーゼです。ALKBH9としても知られ、AlkBジオキシゲナーゼファミリーに属します。
• 高等真核生物における最も一般的なmRNA内部修飾であるN6-メチルアデノシン（m6A）の酸化的脱メチル化を媒介し、それによってmRNAの発現と安定性を制御します。 関連文献： PMID:22002720、PMID:25452335、PMID:26457839、PMID:30197295
• FTOはmRNAキャップ中のN6,2'-O-ジメチルアデノシン（m6Am）も脱メチル化し、デキャッピングを促進することでmRNAの安定性に影響を与え、U6 snRNAのm6Aにも作用します。 関連文献： PMID:28002401、PMID:30197295
• N1-メチルアデニンを除去することでtRNA脱メチル化酵素として機能し、アルキル化DNA／RNA修復に対する活性は低いものの、DNA修復における生体内での役割は不明です。 関連文献： PMID:30197295、PMID:18775698、PMID:20376003
• 細胞内局在は主に核であり、核スペックルおよび細胞質にも存在します。
• FTOは全身で発現しており、副腎、脳（視床下部および下垂体）で高発現し、特定の遺伝子異常を伴う一部の急性骨髄性白血病では過剰発現しています。 関連文献： PMID:17434869、PMID:17496892、PMID:28017614
• 翻訳後修飾にはアセチル化、リン酸化、ユビキチン様結合が含まれ、その活性と安定性を制御している可能性があります。
• 脂肪量、脂肪生成、体重、エネルギー恒常性の調節において重要な役割を果たし、熱産生および脂肪細胞分化にも関与します。 関連文献： PMID:18775698、PMID:20376003、PMID:26287746
• MYC、CEBPA、ASB2、RARAなどのがん遺伝子転写産物上のm6Aを脱メチル化して発現を促進することにより、急性骨髄性白血病において発がん性の役割を果たします。 関連文献： PMID:28017614、PMID:29249359

実験ガイダンスおよび技術上のヒント

• 免疫原はN末端領域（アミノ酸1～100）由来のペプチドであり、全長FTOおよび一部のアイソフォームを検出できる可能性があります。特異性を確認するため、陽性および陰性対照（例：FTO過剰発現ライセートまたはsiRNA処理サンプル）を含めてください。
• ウェスタンブロット（WB）では、還元および変性したタンパク質サンプルを泳動してください。予想されるバンドサイズは約58 kDaです。適切なローディングコントロールおよびブロッキング条件を使用してください。
• IHC-PおよびIF/ICCでは、異なる固定および抗原賦活化法を検討してください。パラフィン包埋切片では、熱誘導エピトープ賦活化が必要な場合があります。既知の陽性組織（脳、副腎）を用いて染色を検証し、アイソタイプ対照を含めてください。
• 免疫沈降（IP）では、抗体は内在性FTO複合体の捕捉に適している可能性があります。溶解バッファー条件および総タンパク質量に応じた抗体量を最適化してください。
• ELISAでは、この抗体を直接法およびサンドイッチ法の両方で使用できます。特定のアッセイ要件に応じて、コーティングおよび検出条件を最適化してください。

CamelBio：ワンストップ調達ブリッジ

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