WB、IHC-P、ELISA用 抗GCDH ウサギポリクローナル抗体 - Q92947

中核製品仕様とパラメータ

生物学的背景：GCDHの機能と局在

• GCDH（グルタリル-CoA脱水素酵素）タンパク質は、別名GCDまたはACAD5とも呼ばれ、ミトコンドリアマトリックスにおいてグルタリル-CoAのクロトニル-CoAとCO₂への酸化的脱炭酸を触媒します。この反応は、L-リシン、L-ヒドロキシリシン、L-トリプトファンの分解における重要なステップです。
• アシル-CoA脱水素酵素ファミリーの一員として、GCDHは電子伝達フラボタンパク質（ETF）を電子受容体として使用し、その活性は適切なアミノ酸異化に不可欠です。
• 選択的スプライシングにより生成されるGCDHの短いアイソフォームは、触媒活性を持たず、調節の複雑さを示唆しています。長いアイソフォームと短いアイソフォームの両方が、線維芽細胞と肝臓で発現しています。
• GCDHはミトコンドリアマトリックスに局在し、脂肪酸およびアミノ酸酸化経路におけるその役割と一致しています。
• このタンパク質は補因子としてFADを結合するフラボタンパク質であり、その欠損は神経障害と有機酸蓄積を特徴とする重篤な代謝疾患であるI型グルタル酸血症を引き起こします。
• 翻訳後修飾にはアセチル化が含まれ、その活性または安定性を調節する可能性があります。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 使用した免疫原は、ヒトGCDH (NP_000150.1) のアミノ酸149-438にまたがる組換え融合タンパク質です。この領域は触媒ドメインの一部をカバーしており、エピトープが両方に存在する場合、長いアイソフォームと短いアイソフォームの両方を認識する抗体を生成する可能性があります。
• ウェスタンブロッティングでは、予測分子量に基づき約48 kDaのバンドが期待されます。ただし、観察される移動度は、翻訳後修飾やアイソフォームの違いにより変動する可能性があります。使用するサンプル系における既知の対照と分子量を検証してください。
• この抗体は、ヒト、マウス、ラットのサンプルと反応することが報告されています。他の種では、使用前に配列相同性を確認し、交差反応性を実験的に検証する必要があります。
• IHC-Pを行う場合は、抗原賦活化条件（例：クエン酸緩衝液 pH 6.0 または EDTA緩衝液 pH 9.0）および抗体希釈率を、検討中の組織タイプと固定法に合わせて最適化する必要があります。
• ポリクローナル抗体として、ロット間での変動の可能性を考慮する必要があります。新しいロットごとに、アッセイ条件の再最適化が必要になる場合があります。

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