WB、ELISA用 抗GIF ウサギポリクローナル抗体 - P27352

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：GIFの機能と局在

• CBLIF (GIF) 遺伝子によってコードされるタンパク質は、胃内因子（IF）とも呼ばれ、コバラミン結合内因子として知られています。これは、ビタミンB12（コバラミン）の吸収に不可欠なものです。
• GIFは胃粘膜細胞（主に壁細胞）から分泌される糖タンパク質であり、シグナルペプチドを含む前駆体として産生されます。
• 機能的には、GIFは胃内で遊離コバラミンと結合します。十二指腸でのタンパク質分解切断後、安定したGIF-コバラミン複合体は回腸のキュビリン（CUBN）受容体と相互作用し、ビタミンB12の取り込みのための受容体介在性エンドサイトーシスを促進します。
• GIF遺伝子は選択的スプライシングを受け、複数のアイソフォームを生成します。CBLIFに関連する疾患変異は内因子欠乏症（IFD）を引き起こし、B12吸収障害により悪性貧血につながります。
• GIFは、構造と機能に重要な多数のジスルフィド結合を持つリンタンパク質であり、コバルトやイオン輸送に関与するタンパク質群に属します。
• 組織発現は胃粘膜に高度に特異的であり、消化管におけるビタミン吸収における役割と一致しています。
• このタンパク質に関連するキーワードには、疾患変異、糖タンパク質、分泌型、シグナル、輸送などがあり、その臨床的および機能的重要性を強調しています。

実験のガイダンスと技術的なヒント

• 使用される免疫原は、ヒトGIFのアミノ酸19-417を含む組換えタンパク質であり、シグナルペプチドを除いた成熟タンパク質に相当するため、この抗体は内在性の分泌型を認識できると考えられます。
• ウェスタンブロットについては、GIFは電気泳動の移動度に影響を与える可能性のある複数のジスルフィド結合を含んでいるため、還元および非還元SDS-PAGE条件での比較を検討してください。
• 胃粘膜における組織特異的な発現を考慮し、ヒト、マウス、またはラットの胃ライセートで抗体を検証し、特異性コントロールとして肝臓のような陰性組織を使用することを検討してください。
• ELISAでは、このポリクローナル抗体はキャプチャーまたは検出試薬として使用できます。サンドイッチELISAの場合、特異性を高めるために抗GIFモノクローナル抗体とのペアリングが推奨されます。
• GIFは分泌タンパク質であるため、細胞または組織培養上清を分析する際、WBやELISAで内在性レベルを検出するために濃縮ステップが必要になる場合があります。
• マウスとラットでの交差反応性が報告されているため、適切な陽性コントロールを使用して、これらの種類におけるエピトープの保存性とアッセイ性能を確認してください。

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