ウエスタンブロット、IHC-P、IF/ICC、ELISA用 抗GOT2ウサギポリクローナル抗体 - P00505

中核製品仕様とパラメータ

生物学的背景: GOT2の機能と局在

• GOT2は、ミトコンドリアアスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、キヌレニンアミノトランスフェラーゼ4（KAT4）、またはプラズマ膜関連脂肪酸結合タンパク質（FABPpm）としても知られ、ヒトではGOT2遺伝子によってコードされます。クラスIピリドキサルリン酸依存性アミノトランスフェラーゼファミリーに属します。
• リンゴ酸-アスパラギン酸シャトルの重要な酵素として、GOT2はミトコンドリア膜を横切る還元当量の移動を促進することで、細胞内NAD(H)の酸化還元バランスを維持するために不可欠です。
• GOT2は、L-キヌレニンのキヌレン酸（KA）への不可逆的な転移を触媒し、これは神経活性代謝物であり、キヌレニン経路の調節と神経学的プロセスに関連しています。
• この酵素は、プラズマ膜におけるFABPpmとしての同一性を通じて、細胞の長鎖脂肪酸取り込みにも役割を果たし、脂質輸送に寄与します。
• GOT2は主にミトコンドリアマトリックスに局在しますが、一部は細胞膜でも検出され、ミトコンドリア代謝と脂肪酸取り込みにおける二重の機能と一致しています。
• 翻訳後修飾には、アセチル化、メチル化、ニトロ化、リン酸化が含まれ、これらはその活性と細胞内分布を調節する可能性があります。このタンパク質は、成熟型を生成するために切断されるミトコンドリア移行ペプチドを伴って合成されます。
• GOT2の変異は、発達性およびてんかん性脳症82（DEE82）と関連しており、脳代謝におけるその重要な役割を強調しています。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原は、ヒトGOT2の残基30–200に対応し、移行ペプチド切断後の成熟ミトコンドリアタンパク質のN末端セグメントを含む領域です。この設計は、ミトコンドリア内での内因性の処理済み型の認識を促進する可能性があります。
• ウエスタンブロットアプリケーションでは、GOT2が主にミトコンドリア性であるため、信号対雑音比を改善するためにミトコンドリア画分を濃縮することを検討してください。前駆体の予測分子量は約47.5 kDaであり、成熟タンパク質は48 kDa付近で移動します。
• 免疫組織化学（IHC-P）および免疫蛍光（IF/ICC）では、GOT2発現が豊富な高代謝活性組織または細胞（例：肝臓、心臓、脳）での検出を検証してください。ミトコンドリアエピトープへのアクセスを確保するために、透過化処理と抗原賦活化のステップを最適化してください。
• ELISAでは、アッセイの感度と特異性を確立するために、組換えGOT2または組織ライセートを標準として使用してください。マウスおよびラットGOT2との交差反応性が観察されており、トランスレーショナルモデルに適しています。

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