Anti-GSDMD (Full length+N terminal) Rabbit Polyclonal Antibody for WB, IF/ICC, ELISA - P57764

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：Gasdermin-Dの機能と局在

• Gasdermin-D（GSDMD）はガスダーミンファミリーのメンバーであり、別名Gasdermin domain-containing protein 1とも呼ばれ、GSDMD遺伝子（DFNA5L、GSDMDC1、FKSG10としても知られる）によってコードされます。その主な機能は、病原体に対する焦性壊死（ピロトーシス）および宿主防御に不可欠な孔形成タンパク質の前駆体として働くことです。
• 正規または非正規のインフラマソーム活性化により、炎症性カスパーゼ（CASP1、CASP4、CASP5）がGSDMDを切断し、自己抑制から解放されたN末端孔形成フラグメントを放出します。
  関連参考文献： PMID:26375003 PMID:26375259 PMID:27418190
• 放出されたN末端フラグメントは形質膜へ移行し、ホスファチジルイノシトール（PI4P、PI(4,5)P2など）、ホスファチジン酸、ホスファチジルセリンには強く結合しますが、非荷電リン脂質には結合せず、そこで10～15 nmの孔へとオリゴマー化します。
  関連参考文献： PMID:27281216 PMID:29898893 PMID:36227980
• これらの孔は、炎症反応に重要なサイトカインである成熟IL-1βおよびIL-18の放出を媒介し、また成熟カスパーゼ-7やミトコンドリアDNA（mtDNA）を放出することもあります。
  関連参考文献： PMID:27281216 PMID:27418190 PMID:29898893
• 一部の細胞タイプでは、ninjurin-1（NINJ1）の下流活性化を介して焦性壊死細胞死が進行し、形質膜の破裂につながります。
  関連参考文献： PMID:33472215 PMID:37198476
• その溶解作用に加え、GSDMD N末端フラグメントは細胞外のグラム陰性菌およびグラム陽性菌を直接殺菌でき、また細胞培養条件下では、Listeria monocytogenesなどの細胞内病原体の増殖を抑制します。
  関連参考文献： PMID:27281216
• 小腸においては、CASP3またはCASP7による切断が転写共役因子を生成し、それが核へ移行してSTAT1とパートナーを形成してCIITAおよびMHCクラスIIの発現を誘導し、それによって食物寛容性を維持します。（配列類似性による）
• パパインアレルゲンによる切断も孔形成N末端フラグメントを生成し、これは特異的に成熟IL-33を放出して2型免疫を促進します。
  関連参考文献： PMID:35794369
• GSDMDは広範に発現しており、食道の基底上層細胞や胃の峡部/頸部、陰窩、腺に顕著に存在し、様々な条件下で細胞質、インフラマソーム、形質膜、ミトコンドリア、核に局在します。

実験のガイダンスと技術的なヒント

• ウェスタンブロッティングにおいて、本抗体はN末端ドメインのアミノ酸154～252内のエピトープを認識します。そのため、全長GSDMD（予測分子量約53 kDa）および切断されたN末端フラグメント（約31～34 kDa）の両方が検出される可能性があります。関連するサンプル系で検証を行い、切断産物を観察するためにインフラマソーム活性化細胞ライセートの使用を検討してください。
• 免疫蛍光（IF）/免疫細胞化学（ICC）では、GSDMDは活性化状態に応じて細胞質、形質膜、核に局在する可能性があります。透過処理と固定条件の最適化が推奨されます。特異性を確認するために適切なコントロールを含めてください。
• ELISAについては、ポリクローナル抗体の性質により、サンドイッチELISA形式でキャプチャー抗体および検出抗体の両方として使用できる可能性があります。異なるエピトープに特異的なモノクローナル抗体と組み合わせることで感度が向上する場合があります。組換えタンパク質を用いた標準曲線を作成することをお勧めします。

CamelBio：ワンストップ調達パートナー

CamelBioは包括的なIVD（体外診断）原材料パートナーとして、検証済みの抗体ペア、最適化されたモノクローナルおよびポリクローナル抗体、バルクの補助試薬を診断メーカーおよび研究ラボに供給しています。焦性壊死（ピロトーシス）および自然免疫分野において、希少ターゲット抗体や組換えタンパク質を含む、GSDMD関連アッセイ開発に必要な材料の調達を支援できます。私たちの合理化されたプラットフォームは、コンセプトから臨床への架け橋となり、IVDプロジェクトのための信頼できるサプライチェーンを確保します。