ウエスタンブロット、IF/ICC、IP、ELISA用 抗GSK3βウサギポリクローナル抗体 - P49841

中核製品仕様とパラメータ

生物学的背景：GSK3βの機能と局在

• GSK3β (GSK3B; gsk-3β) は、構成的に活性なセリン/スレオニンタンパク質キナーゼであり、グリコーゲン合成酵素 (GYS1/GYS2)、翻訳開始因子EIF2B、Wnt経路構成要素 (CTNNB1/β-カテニン、APC、AXIN1)、微小管結合タンパク質 (MAPT/TAU、MACF1) を負に制御します。 関連文献: PMID:11430833 PMID:12554650 PMID:14690523
• インスリンシグナル伝達において、GSK3βはGYS1をリン酸化して阻害し、グリコーゲン合成を調節します。また、EIF2B活性を制御し、タンパク質合成を調節します。 関連文献: PMID:8397507
• Wnt経路では、GSK3βはAPC、AXIN1、β-カテニンと複合体を形成し、β-カテニンのN末端をリン酸化してユビキチン-プロテアソーム系による分解を標的とします。 関連文献: PMID:12554650
• GSK3βは、JUN（DNA親和性を低下させる）、NFATC（核輸出を促進する）、SNAI1（分解を促進する）を含む複数の転写因子をリン酸化します。また、BMAL1、CLOCK、PER2をリン酸化することで概日リズムを調節します。 関連文献: PMID:1846781 PMID:9072970 PMID:15448698 PMID:15647282 PMID:25827072 PMID:19946213 PMID:28903391
• 神経細胞では、GSK3βは極性確立と軸索伸長に必須であり、MAPT/TAUの'Thr-548'をリン酸化して微小管結合を減少させます。過剰リン酸化されたTAUはアルツハイマー病の特徴です。 関連文献: PMID:20067585 PMID:14690523
• GSK3βは、飢餓条件下でKAT5/TIP60をリン酸化し、主要なオートファジー調節因子のアセチル化を促進することでオートファジー調節に関与します。また、死受容体においてDDX3XおよびBRIC2との抗アポトーシス複合体を介してアポトーシスを調節します。 関連文献: PMID:30704899 PMID:18846110
• 細胞質、核、細胞膜に局在し、GSK3βは複数の翻訳後修飾（リン酸化、ユビキチン化、パルミトイル化）を受け、糖尿病、アルツハイマー病、概日リズムと関連しています。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原は、ヒトGSK3βのC末端領域のアミノ酸320-420に対応します。この領域はマウスおよびラットで保存されており、観察された交差反応性と一致します。
• ウエスタンブロット (WB) では、予測される分子量は47 kDaです。リン酸化や選択的スプライシングによりバンドシフトが生じることがあります。ホスファターゼ阻害剤の使用やローディングコントロールによる確認を検討してください。
• GSK3βは多機能キナーゼです。既知の阻害剤（例：CHIR99021）やsiRNAノックダウンを使用して、特定の細胞または組織モデルでの検出を検証してください。
• 免疫蛍光 (IF/ICC) では、エピトープへのアクセス性は固定方法によって異なる場合があります。メタノール固定とパラホルムアルデヒド固定による透過処理をテストしてください。
• ポリクローナル抗体はIPおよびELISAで強力なシグナルを提供できますが、定量的アプリケーションではロット間の一貫性を確認する必要があります。

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