ウエスタンブロット、IHC-P、IF/ICC、ELISA用 抗グアニル酸シクラーゼβ1 (GUCY1B3) モノクローナル抗体 - Q02153

製品の主要仕様とパラメータ

生物学的背景：グアニル酸シクラーゼβ1の機能と局在

• 可溶性グアニル酸シクラーゼβ1サブユニット (GUCY1B3) はGUCY1B1遺伝子のタンパク質産物であり、GCS-beta-3、可溶性グアニル酸シクラーゼ小サブユニット、グアニル酸シクラーゼβ1とも呼ばれる。
• このサブユニットはαサブユニットとヘテロ二量体を形成し、一酸化窒素 (NO) の主要な受容体である可溶性グアニル酸シクラーゼを構成する。NO結合により、この酵素はGTPをcGMPへと変換する触媒作用を示す。cGMPは血管拡張、神経伝達、その他の生理的プロセスを仲介する重要なセカンドメッセンジャーである。
• GUCY1B3はアデニル酸シクラーゼ-4/グアニル酸シクラーゼファミリーに属し、NOを感知するヘム結合ドメイン、中心的なGTPase領域、触媒サイクラーゼドメインを含む。
• 細胞内レベルでは、このタンパク質は主に細胞質に局在し、可溶性酵素としての役割と一致する。
• 組織特異性データは、脳、特に大脳皮質と小脳での発現を示している。これらの部位では、一酸化窒素-cGMPシグナル伝達がシナプス可塑性と神経機能を調節している。
• UniProtの記録は選択的スプライシングをキーワードとして挙げているが、このサブユニットに関しては標準配列を超えた特定のアイソフォームは記載されていない。
• GUCY1B3に関連するキーワードには、3D構造、cGMP生合成、細胞質、ヘム、鉄、金属結合、GTP結合が含まれており、その酵素的および調節的特性を反映している。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原はN末端領域（アミノ酸1–100）にわたる合成ペプチドで構成されており、フルレングスのGUCY1B3の検出を示唆している。特異性は適切な対照で確認すること。
• ウエスタンブロッティングでは、標的バンドは約71 kDa (標準分子量 ~70.5 kDa) に予想される。潜在的な二量体化のアーティファクトを評価するため、還元および非還元条件の使用を検討すること。
• IHC-Pでは、抗原賦活化プロトコルを最適化し、GUCY1B3が検出可能なレベルで発現している脳皮質や小脳などの陽性組織における染色パターンを検証すること。
• IF/ICC実験では細胞質シグナルが得られるはずである。オルガネラマーカーとの共局在研究は、細胞内分布の確認に役立つ可能性がある。
• ELISA用途では、この抗体を捕捉または検出試薬として利用できる。サンドイッチアッセイでは、異なる宿主由来の抗αサブユニット抗体または抗GUCY1B3抗体と組み合わせること。
• マウスおよびラットとの交差反応性があるため、この抗体は一般的なげっ歯類モデルでの研究に適している。ただし、配列変異の可能性があるため、各種の組織または細胞株での性能を検証すること。
• 可溶性グアニル酸シクラーゼの活性はヘムとNOに依存するため、実験条件（例：NOドナーによる細胞刺激）がエピトープのアクセシビリティやタンパク質のコンフォメーションに影響を与える可能性があるか考慮すること。

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