WB、IF/ICC、ELISA用 抗GZMA ウサギ ポリクローナル抗体 - P12544

製品の主要仕様とパラメーター

生物学的背景：グランザイムAの機能と局在

• グランザイムA（CTLトリプターゼ、フラグメンチン-1、ハヌカー因子(HF)としても知られる）は、GZMA遺伝子（CTLA3、HFSP）によってコードされ、細胞傷害性T細胞およびナチュラルキラー(NK)細胞の細胞質顆粒に豊富に存在するセリンプロテアーゼです。
• 免疫シナプスを介して標的細胞に送達された後、LysまたはArg残基の後を切断し、カスパーゼ非依存性のパイロプトーシスを誘導します。 関連文献： PMID:12819770, PMID:32299851, PMID:3257574
• 標的細胞内に入ると、GZMAはガスダーミンB (GSDMB) を切断し、その孔形成部位を放出させてパイロプトーシスと細胞死を引き起こします。 関連文献： PMID:32299851, PMID:34022140, PMID:36157507
• また、Lys-31の後でAPEX1を切断し、その酸化修復活性を破壊します。 関連文献： PMID:12524539
• GZMAは、核小体アセンブリータンパク質SETをLys-189の後で切断し、核小体のアセンブリーを阻害し、SET複合体が核内に移行してDNAをニックおよび分解することを可能にします。 関連文献： PMID:11555662, PMID:12628186, PMID:16818237
• 細胞内局在としては、グランザイムAは細胞質顆粒に局在し、脱顆粒時に分泌されます。
• ジスルフィド結合を持つ糖タンパク質として、最初はチモーゲンとして産生され、利用可能な3D構造を持つよく特徴づけられたセリンプロテアーゼです。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• ウェスタンブロッティングでは、約29 kDaのバンドが期待されます。活性化した細胞傷害性T細胞やNK細胞株の陽性コントロールライセートを使用して検出を検証してください。
• 免疫蛍光/免疫細胞化学では、顆粒状の細胞質内GZMAを検出するために透過処理が必要です。パーフォリンやCD8との共染色により、細胞傷害性細胞の特異性を確認できます。
• ELISAを実施する際は、組換えヒトGZMAを標準品として使用し、関連するサンプルマトリックスにおける直線性を確認することを検討してください。
• この抗体はマウスおよびラットのGZMAと交差反応性を示しますが、種間の定量的比較が必要な場合は、免疫原領域の配列アラインメントを実施することをお勧めします。

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