Anti-HB-EGF Rabbit Polyclonal Antibody for WB, IF/ICC, ELISA - Q99075

主要な製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：HB-EGFの機能と局在

• HB-EGFは、ジフテリア毒素受容体（DTR）としても知られ、上皮成長因子（EGF）ファミリーのメンバーです。これはI型膜貫通前駆体（proHB-EGF）として合成され、その後切断されてEGF様ドメインを含む可溶性成長因子が放出されます。
• 可溶性HB-EGFは、EGFR、ERBB2、ERBB4の強力なリガンドとして作用し、EGF自体よりもEGFRに対する親和性が高く、平滑筋細胞および線維芽細胞に対しては強力な分裂促進因子として機能しますが、内皮細胞に対しては機能しません。
• HB-EGFは、正常な心臓弁の形成および心機能に不可欠であり、平滑筋細胞の増殖を促進することから、心血管の発達および疾患におけるその役割が強調されています。
• 成長因子としての活性に加えて、膜貫通型proHB-EGFはジフテリア毒素の受容体として機能し、毒素の細胞内への侵入を媒介します。
• 細胞内局在に関して、proHB-EGFはシングルパス膜貫通タンパク質として細胞膜に局在しますが、切断された可溶性型は細胞外空間へ分泌され、隣接分泌および傍分泌シグナル伝達の両方を可能にします。
• UniProtによると、HB-EGFはEGF様ドメイン、ヘパリン結合モチーフ、および複数のジスルフィド結合によって特徴づけられ、タンパク質分解処理を受けて成熟した成長因子を生成します。

実験のガイダンスと技術的なヒント

• 免疫原はヒトHB-EGFのアミノ酸20-160に相当し、細胞外ドメインの大部分をカバーしています。この設計により、可溶性成長因子と前駆体の両方を標的とし、関連するアプリケーションで両方の形態を検出することが可能です。
• ウェスタンブロットでは、全長前駆体の予測分子量と一致する約23 kDaのバンドが観察される可能性があります。サンプルによっては、処理された形態に対応する追加のバンドが現れることもあります。
• 免疫蛍光/ICCでは、前駆体および潜在的に内在化または分泌された形態を反映する、膜および/または細胞質の染色パターンが観察される可能性があります。適切なコントロールおよび固定/透過処理法を検証する必要があります。
• ELISAの場合、この抗体を適合した検出抗体とペアにするか、標準的な滴定を実施して、対象分析物の感度と特異性を最適化することを検討してください。
• マウスおよびラットのHB-EGFとの交差反応性が報告されていますが、反応性は変動する可能性があるため、各種および各アプリケーションについて実験条件を検証する必要があります。

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