WB、ELISA用 抗ヒスチジンリッチグリコプロテイン (HRG) ポリクローナル抗体 - P04196

主要な製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：ヒスチジンリッチグリコプロテインの機能と局在

• ヒスチジンリッチグリコプロテイン (HRG) は、ヒスチジン・プロリンリッチグリコプロテイン (HPRG) とも呼ばれ、ヒトではHRG遺伝子によってコードされる血漿糖タンパク質です。
• ヘム、ヘパリン、プラスミノゲン、トロンボスポンジン、2価金属イオンを含む様々なリガンドに結合するアダプタータンパク質として機能し、免疫複合体のクリアランス、細胞接着、血管新生、凝固、および線溶などのプロセスを調節します。
• HRGは、ヘパラン硫酸依存性経路を介して壊死細胞の食作用を促進することにより、壊死細胞の除去を促進します。このプロセスはヘパリンと亜鉛イオンによって調節されます。
• 血管新生において、HRGはCD6を介してトロンボスポンジン (THBS1/THBS2) の抗血管新生作用をブロックし、VEGFシグナル伝達を調節して、焦点接着キナーゼのリン酸化と細胞運動性に影響を与えることで、内皮細胞の挙動を調節します。
• 免疫系内では、HRGは様々な親和性で免疫グロブリン (IgGサブクラス) に結合し、不溶性免疫複合体の形成を阻害してその除去を助けます。また、T細胞と相互作用して細胞形態を変化させます。
• がん生物学において、HRGは腫瘍血管新生と免疫監視において二重の役割を果たし、腫瘍血管の正常化を行い、腫瘍関連マクロファージを極性化して抗腫瘍免疫を促進します。
• 細胞内レベルでは、HRGは分泌されて血漿中に存在し、肝臓、マクロファージ、悪性細胞で発現しています。

実験のガイダンスと技術的なヒント

• 免疫原は、ヒトHRGのN末端領域 (aa 20–260) に相当し、ヒスチジンリッチドメインを含んでいます。ウェスタンブロット法では、HRGが豊富に分泌されるため、ヒト肝臓組織溶解液または血漿/血清をポジティブコントロールとして使用することを検討してください。
• ELISAアプリケーションの場合、組換えHRGタンパク質またはHRG添加サンプルを標準として使用できます。適切なネガティブコントロールを使用してアッセイの特異性を検証してください。
• マウスおよびラットとの交差反応性が示されていますが、免疫原領域の配列相同性を確認し、対象種およびサンプルタイプでの反応性を確認してください。
• HRGはヘパリン結合性タンパク質であるため、サンプル中のヘパリンの存在は抗体結合に影響を与える可能性があります。免疫アッセイを設計する際にこれを考慮してください。
• 特定の実験セットアップに合わせて一次抗体の希釈率を最適化してください。WBにおけるポリクローナル抗体の一般的な開始希釈倍率は1:500から1:2000の範囲ですが、実験的な検証が推奨されます。

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