Anti-Histone H4 Rabbit PolymAb® for WB, IF/ICC, IHC-P, ChIP, ELISA - P62805

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：Histone H4の機能と局在

• Histone H4は、ヌクレオソームオクタマーを形成する4つのコアヒストンタンパク質（H2A、H2B、H3、H4）の1つであり、約147 bpのDNAを巻き付き、ゲノムをクロマチンに凝縮します。
• ヌクレオソームコア成分として、H4は転写、複製、修復のためのDNAアクセシビリティの調整、および染色体の安定性維持において中心的な役割を果たします。
• ヒトでは、H4は複数の染色体座にクラスター化された14のほぼ同一の遺伝子（H4C1–H4C16）によってコードされ、保存された103アミノ酸のタンパク質を生成します。
• H4は核と染色体にのみ局在し、そこで広範な翻訳後修飾（アセチル化、メチル化、リン酸化、シトルリン化、ユビキチン化など）を受け、これらがクロマチン動態を制御する「ヒストンコード」を構成します。
• N末端テール（aa 1–20）の修飾は遺伝子調節に重要です。例えば、特定のリシンでのアセチル化は活性転写と相関し、メチル化は残基に応じて活性化または抑制のシグナルとなります。
• H4遺伝子または調節マークの異常は疾患と関連しています。稀な変異は知的障害を含む神経発達表現型を引き起こし、発生におけるヒストンH4の不可欠な性質を強調しています。

実験的ガイダンスと技術的なヒント

• 免疫原はアミノ酸1–100を標的とし、N末端テールと球状ドメインを含みます。一部のクロマチン状態では、密集した翻訳後修飾がN末端エピトープ認識に影響を与える可能性があることに注意してください。
• ウェスタンブロット（WB）では、約11 kDaに強いバンドが期待されます。塩基性タンパク質を濃縮するため、ポジティブコントロールとして酸抽出ヒストンサンプルを含めてください。
• 免疫蛍光（IF/ICC）および免疫組織化学（IHC-P）では、ヘテロクロマチン領域に凝縮されたクロマチンがエピトープを隠している可能性があります。穏やかなDNAse消化または穏やかな透過処理プロトコルにより、検出が改善される場合があります。
• クロマチン免疫沈降（ChIP）の場合、エピトープのアクセシビリティはクロマチン凝縮度によって異なるため、架橋条件およびネイティブ条件下で、修飾されたヌクレオソームと未修飾ヌクレオソームを濃縮する抗体の能力を検証してください。
• 配列の保存性が高いため（ヒト/マウスH4は同一）、マウスおよびラットとの交差反応性が期待されますが、関連する種およびアプリケーションで特異性を常に確認してください。

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