WB、IHC-P、IF/ICC、ELISA用 抗hnRNP K ウサギモノクローナル抗体 - P61978

主要製品仕様とパラメータ

生物学的背景: hnRNP Kの機能と局在

• hnRNP Kは、poly(C)配列に高い親和性を持つ主要なpre-mRNA結合タンパク質であり、hnRNA代謝、スプライシング、mRNAプロセシングにおいて中心的役割を果たします。
• p53/TP53 DNA損傷応答の重要なメディエーターであり、p21/CDKN1Aなどの遺伝子に対する転写共役活性化因子（スモイル化時）として、またlincRNA-p21などの非コードRNAとの相互作用を介した抑制因子として機能し、アポトーシスと細胞周期停止を調節します。
• ZNF827、HNRNPL、circZNF827を含むリボヌクレオタンパク質複合体の一部として、hnRNP Kは神経細胞分化に関与する遺伝子の転写を負に調節します（PubMed:33174841）。 関連文献: PMID:33174841
• このタンパク質は、核、核質、細胞質、ポドソームなど、複数の細胞内区画に動的に局在し、RNAプロセシング、シグナル伝達、細胞接着における役割と一致しています。
• hnRNP Kは、リン酸化、アセチル化、メチル化、スモイル化、グリコシル化など、広範な翻訳後修飾を受け、その活性、局在、相互作用ネットワークを調節します。
• 一本鎖DNA結合活性を持ち、宿主-ウイルス相互作用に関与しており、細胞恒常性と病原性への多面的な寄与が示されています。
• HNRNPK pre-mRNAの選択的スプライシングにより複数のアイソフォームが生成されますが、それらの機能的区別についてはここでは完全には特徴付けられていません。
• UniProtからのキーワードには、mRNAプロセシング、スプライセオソーム、転写調節、活性化因子、抑制因子、知的障害が含まれており、遺伝子発現と疾患における広範な調節的役割が強調されています。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原は、ヒトhnRNP Kのアミノ酸1-100にまたがる合成ペプチドです。マウスおよびラットのオルソログとの配列アライメントは高い相同性を示し、報告されている交差反応性を支持します。対象とする種および組織での特異性を検証してください。
• ウエスタンブロット（WB）では、49-51 kDa付近の主要なバンドが期待されます。ただし、広範な翻訳後修飾のため、複数のバンドやわずかな分子量シフトが観察される場合があります。適切な分子量マーカーと陽性対照（例：HeLaまたはHEK293全細胞溶解液）を使用してください。
• 免疫組織化学（IHC-P）および免疫蛍光（IF/ICC）では、細胞内局在パターンを分析してください：核および細胞質の染色の両方が期待されます。抗原賦活化（例：クエン酸バッファー pH 6.0）と透過化の工程を最適化してください。共局在研究にはポドソームマーカーの使用を検討してください。
• ELISAアプリケーションでは、この抗体は捕捉または検出試薬として機能する可能性があります。ただし、アッセイ条件（コーティングバッファー、ブロッキング、洗浄工程）と抗体のペアリングは経験的に決定する必要があります。
• hnRNP Kがp53シグナル伝達に関与していることを考慮し、DNA損傷誘導（例：ドキソルビシンまたはUV処理による）後の発現変化を評価することは、機能的検証戦略として役立ちます。

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